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6种虫媒病毒PCR-Mass检测方法的建立
引用本文:朴静子,王晓宏,陈唯军,杨银辉,姜永强,曹远银. 6种虫媒病毒PCR-Mass检测方法的建立[J]. 沈阳农业大学学报, 2012, 43(3): 300-305
作者姓名:朴静子  王晓宏  陈唯军  杨银辉  姜永强  曹远银
作者单位:1. 沈阳农业大学植物保护学院,沈阳110161;军事医学科学院微生物流行病研究所,北京100071
2. 军事医学科学院微生物流行病研究所,北京,100071
3. 沈阳农业大学植物保护学院,沈阳,110161
基金项目:国家科技重大专项项目(2009ZX10004-103)
摘    要:建立了一种可快速、同时检测流行性乙型脑炎病毒(JEV)、东方马脑炎病毒(EEEV)、西方马脑炎病毒(WEEV)、西尼罗病毒(WNV)、森林脑炎病毒(TBEV)和圣路易脑炎病毒(StLEV)等6种虫媒病毒的PCR-Mass检测方法.根据GenBank登录的上述6种病毒的序列信息,经过分析比对,设计6组扩增引物和延伸探针,初步建立针对上述6种病毒的PCR-Mass检测体系.采用上述6种虫媒病毒和其他常见致病性病毒为检测对象,确定PCR-Mass体系的特异性;通过对重组质粒的定量检测,确定该体系的检测灵敏度;并利用该体系对12份TBE阳性和10份JEV阳性脑脊液样本进行检测,评价检测方法的实用性和临床应用价值.结果表明:PCR-Mass检测方法可同时检测上述6种虫媒病毒,而对其他病毒检测均为阴性,无交叉反应现象;6种虫媒病毒的最低检出浓度均为102copies·mL-1;对22份阳性样本的检测结果均呈阳性.本研究建立的PCR-Mass检测方法可实现对6种虫媒病毒的快速、同时检测,具有良好的特异性和较高的灵敏度.

关 键 词:虫媒病毒  PCR-Mass方法  同时检测

Establishment of PCR-Mass Assay for the Detection of Six Arboviruses
PIAO Jing-zi , WANG Xiao-hong , CHEN Wei-jun , YANG Yin-hui , JIANG Yong-qiang , CAO Yuan-yin. Establishment of PCR-Mass Assay for the Detection of Six Arboviruses[J]. Journal of Shenyang Aricultural University, 2012, 43(3): 300-305
Authors:PIAO Jing-zi    WANG Xiao-hong    CHEN Wei-jun    YANG Yin-hui    JIANG Yong-qiang    CAO Yuan-yin
Affiliation:1(1.College of Plant Protection,Shenyang Agricultural University,Shenyang 110161,China;2.Institute of Microbiology and Epidemiology,Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100071,China)
Abstract:
Keywords:
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