| 草菇菌种退化相关分子标记的筛选 |
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| 引用本文： | 李丹青,王 杰. 草菇菌种退化相关分子标记的筛选[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2015, 43(8): 195-201 |
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| 作者姓名： | 李丹青 王 杰 |
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| 作者单位： | 华南农业大学 食品学院,华南农业大学 食品学院 |
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| 基金项目： | 高等学校博士学科点专项科研基金项目（20104404120011） |
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| 摘 要： | 【目的】基于SRAP分子标记技术,筛选出与草菇(Volvariella volvacea)菌丝退化性状紧密连锁的分子标记,为进一步研究目标性状基因的克隆与功能奠定基础。【方法】以草菇正常生长菌株V51(对照)与其菌丝退化菌株(VNM1~10)为材料,采用群体分离分析法分别构建2种草菇的近等基因池。利用SRAP分子标记技术,寻找两类菌株的差异片段,回收差异片段后与pMD-18T载体连接,构建重组质粒pMD-VNMDF并转化E.coli DH5α感受态细胞,将筛选的阳性克隆测序。根据差异片段序列设计引物,将其转化成SCAR分子标记,并对草菇正常菌株V51及其菌丝退化菌株VNM进行扩增试验,验证该标记的真实性和可靠性。【结果】81对SRAP引物组合中有2对引物可扩增出稳定差异条带,其中引物对Me8-Em4PCR扩增出长度约300bp的差异条带(命名为VNMDF)存在于退化菌株中。对SRAP分子标记片段VNMDF回收、测序并进行序列分析发现,该片段长度为279bp,其核酸、氨基酸序列与编码26S蛋白酶体亚基的相似性分别达到81%和93%。利用SCAR特异引物对SCAR250可在菌丝退化菌株中稳定扩增出长度约250bp片段,与预期大小(279bp)一致,而在正常菌株中未扩增出此片段。【结论】获得了1条可能与草菇菌丝退化性状基因紧密连锁的SRAP分子标记,并将其成功转化为SCAR标记(SCAR250)。
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| 关 键 词： | 草菇；菌种退化；SRAP；SCAR |
| 收稿时间： | 2014-09-19 |
Screening of molecular markers associated with degeneration of Volvariella volvacea strains |
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| LI Dan qing,WANG Jie and LI Dan qing,WANG Jie. Screening of molecular markers associated with degeneration of Volvariella volvacea strains[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2015, 43(8): 195-201 |
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| Authors: | LI Dan qing WANG Jie LI Dan qing WANG Jie |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Volvariella volvacea strain degeneration SRAP SCAR |
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