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甘蔗线条花叶病毒 RT-LAMP 检测方法的建立及应用
引用本文:李战彪,谢慧婷,崔丽贤,蔡健和,秦碧霞.甘蔗线条花叶病毒 RT-LAMP 检测方法的建立及应用[J].广东农业科学,2020,47(4):92-98.
作者姓名:李战彪  谢慧婷  崔丽贤  蔡健和  秦碧霞
作者单位:广西农业科学院植物保护研究所 / 广西作物病虫害生物学重点实验室,广西 南宁 530007
基金项目:Major Science and Technology Project of Guangxi Province(Guike AA17202042-12);Basic Research Project of Guangxi Academy of Agricultural Sciences(2015YT42)
摘    要:【目的】建立甘蔗线条花叶病毒(Sugarcane streak mosaic virus,SCSMV)的 RT-LAMP 检测方法,为 SCSMV 的检测提供技术支持。【方法】根据甘蔗线条花叶病毒外壳蛋白基因的保守序列设计特异引物,优化 RT-LAMP 的反应条件,对比分析 RT-LAMP 的检测灵敏度和特异性;并在 RT-LAMP 反应产物中加入 SYBR GREEN I 进行可视化检测,方便快速判定结果。【结果】成功建立了一种用于检测 SCSMV 的 RT-LAMP 方法,可在 60 ~ 63 ℃下 60 min 完成对 SCSMV 的检测,且具有较高的灵敏度,比传统 RT-PCR 高 100 倍,最低检测RNA 浓度为 167.9×10-5 ng。此外,该方法具有较高的特异性,可特异检测 SCSMV。【结论】建立了一种灵敏、简便、快速的 SCSMV RT-LAMP 检测方法并用于田间甘蔗样品的检测。

关 键 词::甘蔗  甘蔗线条花叶病毒(SCSMV)  环介导等温扩增(RT-LAMP)  外壳蛋白基因  田间检测

Establishment and Application of RT-LAMP Detection Method for Sugarcane Streak Mosaic Virus
LI Zhanbiao,XIE Huiting,CUI Lixian,CAI Jianhe,QIN Bixia.Establishment and Application of RT-LAMP Detection Method for Sugarcane Streak Mosaic Virus[J].Guangdong Agricultural Sciences,2020,47(4):92-98.
Authors:LI Zhanbiao  XIE Huiting  CUI Lixian  CAI Jianhe  QIN Bixia
Abstract:
Keywords:
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