蓝舌病病毒抗原捕获ELISA检测方法的建立 |
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引用本文: | 苗海生,李乐,廖德芳,朱建波,寇美龄,杨永钦,孙强,李华春.蓝舌病病毒抗原捕获ELISA检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2015(3):216-219. |
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作者姓名: | 苗海生 李乐 廖德芳 朱建波 寇美龄 杨永钦 孙强 李华春 |
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作者单位: | 云南省畜牧兽医科学院 |
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基金项目: | 国家农业公益性行业科研专项(201303035);公益性行业(农业)科研专项(201103008);云南省应用基础研究面上项目(2013FZ166) |
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摘 要: | 为建立蓝舌病病毒(BTV)病原学检测方法,本研究以纯化的BTV-1免疫绵羊和兔子,制备高免血清。以绵羊抗BTV血清为捕捉抗体、以兔抗BTV血清和羊抗兔Ig G-HRP为检测抗体建立了检测BTV的抗原捕获ELISA(AC-ELISA)方法。该方法能够特异性检测BTV,对羊痘病毒、赤羽病病毒无交叉反应,与鹿流行性出血热鸡胚样品有微量交叉反应,但样品OD450nm/阴性对照OD450nm低于阴阳性临界值,不影响结果判定;敏感性试验检测结果表明该方法可以检出102.79 TCID50的病毒;批内和批间重复性试验变异系数分别为1.44%~8.46%和2.26%~12.44%;采用该方法与RT-PCR方法对60份鸡胚样品进行检测,阳性符合率为90%。本研究建立的AC-ELISA方法为BTV抗原检测提供了一种快速、实用的技术手段。
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关 键 词: | 蓝舌病病毒 AC-ELISA 抗原检测 |
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