利用转基因番茄表达人成纤维细胞生长因子21(FGF21) |
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引用本文: | 付宏岐,李海燕,庞实锋. 利用转基因番茄表达人成纤维细胞生长因子21(FGF21)[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2011, 39(8): 163-170 |
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作者姓名: | 付宏岐 李海燕 庞实锋 |
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作者单位: | 吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心,中药材学院;吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心,生命科学学院;广东医学院 生物教研室 |
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基金项目: | 国家高新技术研究与发展计划项目(“863”项目)生物反应器重大专项(2007AA100503);吉林省科技发展重点计划项目(20070922);教育部高等学校科技创新工程重大项目(70S018) |
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摘 要: | 【目的】在番茄中表达人成纤维细胞生长因子-21(Fibroblast growth factor-21,FGF21),为利用植物反应器规模化生产FGF21奠定基础。【方法】以甘露糖-6-磷酸异构酶基因(pmi)作为转基因植物的选择标记,将人源fgf21基因克隆至表达载体pCAMBIA1390RⅡ(简写为p1390RⅡ)上,构建重组表达质粒p1390 RⅡMFGF21。采用冻融法将质粒p1390RⅡMFGF21转入根瘤农杆菌EHA105,叶盘法转化番茄(Lycopersicon esculentum)“中蔬6号”,采用PCR检测、Southern杂交筛选转基因番茄阳性植株,并对FGF21蛋白在转基因番茄叶片中的表达进行了Western blot分析。【结果】成功构建了带pmi安全选择标记基因的植物双元表达载体p1390RⅡMFGF21,在番茄中初步建立了以pmi为选择标记基因的遗传转化体系,共获得了26株转基因番茄植株,其中5株为阳性克隆,转化率为19.2%。采用PCR扩增和Southern blot分析进行检测,结果表明,重组fgf21基因已整合到转基因番茄基因组中。Western blot分析检测结果显示,FGF21蛋白在转基因番茄叶片中有一定水平的表达,并具有良好的抗原性。【结论】获得了以pmi为选择标记成功表达FGF21蛋白的转基因番茄遗传体系。
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关 键 词: | 农杆菌;成纤维细胞生长因子-21;甘露糖-6-磷酸异构酶;生物反应器;番茄;遗传转化 |
收稿时间: | 2011-01-04 |
Expression of fibroblast growth factor 21 in transgenic tomato plants |
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Abstract: | |
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Keywords: | Agrobacterium tumefaciens FGF21 PMI plant bioreactor tomato transformation |
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