| 人成纤维细胞生长因子-21的拟南芥油体表达系统构建 |
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| 引用本文： | 付宏岐,李海燕,宠实锋. 人成纤维细胞生长因子-21的拟南芥油体表达系统构建[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2011, 39(8): 190-196 |
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| 作者姓名： | 付宏岐 李海燕 宠实锋 |
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| 作者单位： | 吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心，中药材学院；渭南职业技术学院;吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心，生命科学学院;广东医学院 生物教研室 |
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| 基金项目： | 国家“863”高技术研究发展计划项目生物反应器重大专项（2007AA100503）；吉林省科技发展计划重点项目（20070922）；教育部高等学校科技创新工程重大项目（70S018） |
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| 摘 要： | 【目的】利用拟南芥(Arabidopsis thaliana)油体系统表达人成纤维细胞生长因子-21(Fibroblastgrowth factor-21,FGF21),为利用植物油体表达系统规模化生产FGF21奠定基础。【方法】以磷酸甘露糖异构酶(PMI)基因作为转基因植物的安全筛选标记,将带有组氨酸标签的人源FGF21基因与大豆油体蛋白基因融合,克隆至大豆油体蛋白启动子驱动的表达载体pCAMBIA1390MDo(p1390MDo)上,构建植物双元表达载体p1390MDoFGF21。采用冻融法将植物双元表达载体p1390MDoFGF21转入农杆菌GV3101,花粉管导入法转化拟南芥,采用PCR检测、Southern blot筛选转基因拟南芥阳性植株(T0),并对FGF21蛋白在转基因拟南芥种子(T1)中的表达进行Western blot分析。【结果】成功构建了带PMI安全筛选标记的植物双元表达载体p1390MDoFGF21。PCR扩增和Southern blot分析结果表明,重组FGF21融合基因以单拷贝和多拷贝2种方式已整合到转基因拟南芥基因组中。BandScand 5.0软件和Western blot分析结果显示,FGF21融合蛋白约占转基因拟南芥种子可溶性蛋白的3.76%,并具有良好的免疫原性。【结论】FGF21融合基因已经转入拟南芥中,并在以PMI为选择标记的转基因拟南芥种子中成功高效表达。
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| 关 键 词： | 拟南芥 成纤维细胞生长因子-21 油体表达 磷酸甘露糖异构酶 |
| 收稿时间： | 2011-01-17 |
Establishment of an Arabidopsis thaliana oil body-based expression system of human fibroblast growth factor 21 |
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| FU Hong-qi,a,b,LI Hai-yan,a,c,PANG Shi-feng,YANG Jing,a,XUE Ping,a,c,LIU Xiu-ming,a,WANG Yan-fang,a,b,LI Ying,LI Hong-zhi,LI Xiao-. Establishment of an Arabidopsis thaliana oil body-based expression system of human fibroblast growth factor 21[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2011, 39(8): 190-196 |
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| Authors: | FU Hong-qi a b LI Hai-yan a c PANG Shi-feng YANG Jing a XUE Ping a c LIU Xiu-ming a WANG Yan-fang a b LI Ying LI Hong-zhi LI Xiao- |
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| Affiliation: | FU Hong-qi1a,b,2,LI Hai-yan1a,c,PANG Shi-feng3,YANG Jing1a,XUE Ping1a,LIU Xiu-ming1a,WANG Yan-fang1a,LI Ying4,LI Hong-zhi5,LI Xiao-kun1a(1 a Ministry of Education Engineering Research Center of Bioreactor and Pharmaceutical Development,b College of Traditional Chinese Medicine,c College of Life Sciences,Jilin Agricultural University,Changchun,Jilin 130118,China,2 Weinan Vocational &Technical College,Weinan,Shaanxi 714000,3 Department of Biology,Guangdong Medical College,Dongguan,Guangdong 523808,C... |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Arabidopsis thaliana FGF21 oil body phosphomannose-isomerase (PMI) |
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