恶性疟原虫3D7株AP核酸内切酶的原核表达及多克隆抗体的制备 |
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引用本文: | 土志伟,赵帅杰,常志广,陆慧君,姜宁,陈启军.恶性疟原虫3D7株AP核酸内切酶的原核表达及多克隆抗体的制备[J].吉林农业大学学报,2016(3). |
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作者姓名: | 土志伟 赵帅杰 常志广 陆慧君 姜宁 陈启军 |
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作者单位: | 吉林大学人兽共患病研究所,长春,130062 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(81130033) |
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摘 要: | 为研究恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)3D7株AP核酸内切酶(AP endonuclease)的功能,通过PCR的方法扩增PF3D7_0305600(292~1 137 bp),构建克隆载体。测序正确后,将该片段插入到pET-28a和p GEX-4T-1,构建重组表达载体p ET-28a-Ae、p GEX-4T-1-Ae。将表达载体转入BL21-Codon Plus表达重组蛋白r-Ae-His和r-Ae-GST,经SDS-PAGE和Western blot鉴定,r-Ae-His免疫家兔制备多克隆抗体,并用ELISA检测抗血清效价,Western blot检测抗体特异性。结果表明:表达的r-Ae-His分子量约为39 ku,r-Ae-GST分子量约为60 ku。制备的多克隆抗体能够特异性地识别天然蛋白,可用于恶性疟原虫3D7株AP核酸内切酶的后续研究。
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关 键 词: | 恶性疟原虫 AP核酸内切酶 基因克隆 多克隆抗体 药物靶点 |
Prokaryotic Expression and Preparation of Polyclonal Antibodies of AP Endonuclease of Plasmodium falciparum Strain 3D7 |
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Abstract: | |
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Keywords: | Plasmodium falciparum AP endonuclease gene cloning polyclonal antibody target of drug |
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