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西瓜cDNA 表达文库构建及镰刀菌致病因子FonSIX6 互作蛋白的筛选和鉴定
引用本文:牛晓伟,唐宁安,范敏.西瓜cDNA 表达文库构建及镰刀菌致病因子FonSIX6 互作蛋白的筛选和鉴定[J].园艺学报,2012,39(10):1958-1966.
作者姓名:牛晓伟  唐宁安  范敏
作者单位:(1 浙江省农业科学院蔬菜研究所,杭州 310021;2 浙江师范大学,浙江金华 321004)
基金项目:浙江省农业科学院科研启动项目,浙江省农业科学院创新能力提升工程项目,国家自然科学基金项目
摘    要: 尖孢镰刀菌在与寄主的相互作用中分泌几个特定的富含半胱氨酸的小分子量蛋白(15.8 ~ 29.9 kD)进入木质部中启动致病力,被称为SIX(Secreted in xylem)蛋白。其中,SIX6蛋白是一个致病因子。西瓜专化型尖孢镰刀菌Fon(Fusarium oxysporum f. sp. niveurn)是引起西瓜枯萎病的病原真菌。为了解与FonSIX6存在相互作用的西瓜蛋白及其信号传导途径,克隆了FonSIX6基因,将FonSIX6的编码区与酵母GAL4的DNA结合功能区融合,构建成酵母诱饵蛋白表达载体pGBKT7-SIX6,进而转化到酵母菌株Y2H Gold中,经检测证实不具有毒性和自激活功能,可以用于酵母双杂交研究。同时,以国际上公认的抗枯萎病材料PI296341-FR构建酵母表达文库。采用酵母双杂交的方法,筛选到14个相互作用靶蛋白。分析筛选到的蛋白主要参与寄主的能量代谢、光合作用和基因表达调控,推测FonSIX6作用的靶位点主要是破坏寄主能量系统并影响光合作用,而寄主对其响应的方式是调控抗病基因的表达。

关 键 词:西瓜  枯萎病  效应蛋白  酵母双杂交

Construction of cDNA Expression Library of Watermelon and Screening and Identification of Interaction Partner of FonSIX6,a Virulence Factor from Fusarium oxysporum f. sp. niveurn
NIU Xiao-wei,TANG Ning-an,and FAN Min.Construction of cDNA Expression Library of Watermelon and Screening and Identification of Interaction Partner of FonSIX6,a Virulence Factor from Fusarium oxysporum f. sp. niveurn[J].Acta Horticulturae Sinica,2012,39(10):1958-1966.
Authors:NIU Xiao-wei  TANG Ning-an  and FAN Min
Institution:(1Institute of Vegetables,Academy of Zhejiang Agricultural Sciences,Hangzhou 310021,China;2Zhejiang NormalUniversity,Jinhua,Zhejiang 321004,China)
Abstract:
Keywords:watermelon  fusarium wilt  effector protein  yeast two hybrid
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