| 表达产气荚膜梭菌α—β融合蛋白基因工程菌株的构建 |
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| 引用本文： | 卫广森,许崇波. 表达产气荚膜梭菌α—β融合蛋白基因工程菌株的构建[J]. 中国兽药杂志, 2001, 35(5): 5-9 |
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| 作者姓名： | 卫广森 许崇波 |
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| 作者单位： | 1. 辽宁省益康生物制品厂,辽宁,辽阳,111000
2. 解放军军需大学军事兽医研究所,吉林,长春,130062 |
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| 摘 要： | 用PCR从含产气荚膜俊菌α毒素基因的质粒pXETA1中护增出α毒素基因，用NcoI和BamHI双酶切该α毒素基因，回收0.95kb的α毒素基因片段，再用NcoI和BamHI双酶切含产气荚膜梭菌β毒素基因质粒pXETB2，与上述回收的α毒素基因片段连接，转化至受体菌BL21（DE3）中。经NcoI、BamHI、NotI酶切反应鉴定和核苷酸序列分析证实，获得了理想重组质粒pXCPAB2，该重组质粒含有α-β融合基因。重组菌株BL21（DE3）（pXCPAB2）经IPTG诱导后，其表达产物经ELISA检测和SDS-PAGE分析，结果表明重组菌株可以高效表达α-β融合蛋白，该融合蛋白占菌体总蛋白的22.14%。用从IPTG诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原免疫小鼠，免疫小鼠至少能抵抗2MLD的C型产气荚膜梭菌的攻击。这表明构建的工程菌株BL21（DE3）（pXCPAB2)可以作为预防仔猪红痢基因工程菌苗的候选株。
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| 关 键 词： | 气荚膜梭菌 α－β融合蛋白 基因工程 菌株 动物 坏死性肠 |
| 文章编号： | 1002-1280(2001)-05-0005-04 |
| 修稿时间： | 2001-02-26 |
Construction of Genetically Engineered Strain Expressing Clostridium perfringens Alpha-Toxin and Beta-Toxin Fusion Protein |
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| WEI Guang-sen,XU Chong-bo. Construction of Genetically Engineered Strain Expressing Clostridium perfringens Alpha-Toxin and Beta-Toxin Fusion Protein[J]. Chinese Journal of Veterinary Drug, 2001, 35(5): 5-9 |
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| Authors: | WEI Guang-sen XU Chong-bo |
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| Affiliation: | WEI Guang sen 1,XU Chong bo 2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Closridium perfringens alpha toxin beta toxin fusion gene gene expression |
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