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| Bt杀虫蛋白基因cry8Ea2的克隆、表达和活性 | |
| 引用本文： | 刘兴龙,程林友,李天龙,李长友,李国勋.Bt杀虫蛋白基因cry8Ea2的克隆、表达和活性[J].华北农学报,2008,23(4). |
| 作者姓名： | 刘兴龙 程林友 李天龙 李长友 李国勋 |
| 作者单位： | 1. 河北农业大学河北省农作物病虫害生防工程技术中心,河北保定071001;青岛农业大学无脊椎动物细胞培养和细胞工程中心,山东青岛266109 2. 青岛农业大学无脊椎动物细胞培养和细胞工程中心,山东青岛,266109 3. 河北农业大学河北省农作物病虫害生防工程技术中心,河北保定,071001 |
| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划)，山东省教育厅资助项目 |
| 摘 要： | 根据已知Bt cry8类基因的全长序列设计一对特异性引物JJX5和JJX3,以Bt菌株B-DLL的质粒DNA为模板扩增出3.5 kb大小的片段;将该片段插入大肠杆菌表达载体pET-21b中,并完成了该片段的全序列测定.该基因编码区为3 495 bp,编码的蛋白质由1 164个氨基酸残基组成,相对分子质量为131.8 kDa,等电点为pH 4.71,为弱酸性蛋白.该基因(GenBank:EU047597)编码的氨基酸序列与Cry8Ea1的氨基酸序列同源性高达99.31%,被国际Bt基因命名委员会正式命名为cry8Ea2.经1PTG诱导后该基因在大肠杆菌BL21(DE3)中能够正常表达130 kDa的蛋白.表达产物对暗黑鳃金龟.琉璃弧丽金龟和柳蓝叶甲具有活性,在浓度为8.98ug/s时对暗黑鳃金龟、琉璃弧丽金龟一龄幼虫14 d的校正死亡率分别为46.67%和55.56%;在浓度为89.8 ug/mL时对柳蓝叶甲三龄幼虫96 h的校正死亡率为33.33%. |
| 关 键 词： | cry8Ea2基因 基因克隆 蛋白表达 杀虫活性 |
Cloning, Expression and Insecticidal Activity of cry8Ea2 Gene from Bacillus thuringiensis Strain B-DLL |
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| LIU Xing-long,CHENG Lin-you,LI Tian-long,LI Chang-you,LI Guo-xun.Cloning, Expression and Insecticidal Activity of cry8Ea2 Gene from Bacillus thuringiensis Strain B-DLL[J].Acta Agriculturae Boreali-Sinica,2008,23(4). | |
| Authors: | LIU Xing-long CHENG Lin-you LI Tian-long LI Chang-you LI Guo-xun |
| Abstract: | |
| Keywords: | Bt |
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