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高产吩嗪-1-甲酰胺的绿针假单胞菌的诱变与基因工程育种
引用本文:张平原,彭华松,沈雪梅,王威,张雪洪.高产吩嗪-1-甲酰胺的绿针假单胞菌的诱变与基因工程育种[J].上海交通大学学报(农业科学版),2015(2):90-94.
作者姓名:张平原  彭华松  沈雪梅  王威  张雪洪
作者单位:上海交通大学生命技术学院微生物代谢国家重点实验室
基金项目:国家自然科学基金(31270084);国家973计划项目(2012CB721005);国家863计划项目(2012AA022107)
摘    要:产量低是限制生物农药吩嗪-1-甲酰胺(Phenaizne-1-carboximade,PCN)推广应用的主要因素。本文综合使用诱变育种和基因工程改造来提高绿针假单胞菌的PCN产量。诱变育种使用亚硝基胍(NTG)和紫外线(UV)处理绿针假单胞菌HT66野生型菌株,以平板菌落表面的绿色PCN晶体量为指标建立高通量诱变筛选方法,通过10轮稳定可靠的诱变处理,获得的诱变高产株P3中PCN产量达到1 697mg/L,是野生菌株的3.99倍。在固体平板上培养时,P3菌株的菌落更大,PCN晶体更多且出现更早。在诱变育种的基础上进一步进行基因工程改造,敲除P3株中负调控PCN合成的rpeA基因,获得的P3ΔrpeA菌株PCN产量达到2 167mg/L,充分证明了2种育种方法结合使用的高效性。

关 键 词:绿针假单胞菌  PCN  诱变  基因敲除
收稿时间:2014/3/14 0:00:00

Mutagenesis and Genetic Engineering Breed of Pseudomonas chlororaphis with High Yield of Phenaizne-1-Carboximade
ZHANG Ping-yuan,PENG Hua-song,SHEN Xue-mei,WANG Wei and HANG Xue-hong.Mutagenesis and Genetic Engineering Breed of Pseudomonas chlororaphis with High Yield of Phenaizne-1-Carboximade[J].Journal of Shanghai Jiaotong University (Agricultural Science),2015(2):90-94.
Authors:ZHANG Ping-yuan  PENG Hua-song  SHEN Xue-mei  WANG Wei and HANG Xue-hong
Institution:ZHANG Ping-yuan;PENG Hua-song;SHEN Xue-mei;WANG Wei;HANG Xue-hong;State Key Laboratory of Microbial Metabolism,School of Life Sciences & Biotechnology,Shanghai Jiaotong University;
Abstract:
Keywords:Pseudomonas chlororaphis  PCN  mutagenesis  gene knockout
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