| Sleeping Beauty (SB)转座子介导增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)体内转染鸡胚胎 |
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| 引用本文： | 薛松磊,张立,谢雨琇,李庆平,冯晓军,沈丹,宋成义,高波.Sleeping Beauty (SB)转座子介导增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)体内转染鸡胚胎[J].农业生物技术学报,2013,21(2). |
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| 作者姓名： | 薛松磊 张立 谢雨琇 李庆平 冯晓军 沈丹 宋成义 高波 |
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| 作者单位： | 扬州大学动物科学与技术学院,扬州,225009 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，江苏省博士后科研资助项目，江苏高校优势学科建设工程资助项目 |
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| 摘 要： | 为了探索转座子介导技术在鸡胚中的转染效果,本研究采用鸡蛋开窗法将Sleeping Beauty (SB)单质粒转座载体pT2-SV40-EGFP-SB11注射至孵化36 h鸡(Gallus domes ticus)胚盘中,同时设开窗不注射组和不开窗组.利用体视荧光显微镜和RT-PCR方法检测增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)表达率,并比较不同阶段的胚胎成活率、孵化率以及蛋重变化.结果表明,EGFP在鸡胚胎中获得较高的表达率(40％～89％)；开窗组和不开窗组在胚胎发育早期蛋重变化差异不显著(P＞0.05),而后期开窗注射组的蛋重比例显著低于不开窗组(P＜0.05)；三组胚胎的成活率和孵化率在整个发育过程中变化显著(P＜0.05).本实验初步证明了经改良的鸡蛋开窗法可用于鸡胚转基因研究,并初步建立了SB转座子介导外源基因在鸡胚中转染方法.
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| 关 键 词： | SB转座子 鸡胚盘 转染 鸡蛋开窗 |
The Enhanced Green Fluorescent Protein Gene(EGFP) Transfer Mediated by Sleeping Beauty Transposon in Chicken(Gallus domesticus) Embryo |
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