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洋葱腐烂病菌荧光定量PCR检测体系的建立
引用本文:张仑,高文娜,殷幼平,王中康. 洋葱腐烂病菌荧光定量PCR检测体系的建立[J]. 农业生物技术学报, 2013, 21(3)
作者姓名:张仑  高文娜  殷幼平  王中康
作者单位:1. 重庆大学生物工程学院,基因工程研究中心,重庆400030
2. 北京出入境检验检疫局,北京,100026
基金项目:国家质检总局科技计划项目
摘    要:唐菖蒲伯克霍尔德菌洋葱致病型(Burkholderia gladioli pv.alliicola),是重要的植物病原细菌检疫性有害生物.本研究的目的是建立特异、灵敏、快速的TaqMan探针荧光定量PCR方法用于检测洋葱腐烂病菌(B.gladioli pv.alliicola).利用洋葱腐烂病菌保守基因序列设计和筛选特异性引物和TaqMan探针,优化PCR反应体系和反应条件.荧光定量PCR菌液检测灵敏度达到1.02×102 CFU/mL,DNA检测灵敏度达到1.73×10-4 ng/μL,反应时间仅需1h左右,对14种伯克氏菌属Burkholderia)参比菌种的特异性检测结果显示,洋葱腐烂病菌具有明显的扩增曲线生长,表明建立的荧光定量PCR体系具有非常高的特异性.同时对洋葱(Allium cepa)种子进行了模拟带菌检测,结果表明,建立的洋葱腐烂病菌荧光定量PCR检测体系能够检出模拟样品中的洋葱腐烂病菌,验证了检测体系的实用性.本研究建立的洋葱腐烂病菌荧光定量PCR检测体系能够有效用于洋葱腐烂病菌的鉴定,为进出口口岸和基层检验检疫部门提供了一种简便、快速、准确的洋葱腐烂病菌分子检测手段.

关 键 词:唐菖蒲伯克霍尔德菌洋葱致病菌  洋葱腐烂病菌  荧光定量PCR  种子模拟带菌检测

Real-time Fluorescent Quantitative PCR Detection for Burkholderia gladioli pv.alliicola
ZHANG Lun , GAO Wen-Na , YIN You-Ping , WANG Zhong-Kang. Real-time Fluorescent Quantitative PCR Detection for Burkholderia gladioli pv.alliicola[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2013, 21(3)
Authors:ZHANG Lun    GAO Wen-Na    YIN You-Ping    WANG Zhong-Kang
Abstract:
Keywords:
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