| 酵母双杂交筛选水稻OsMADS15互作蛋白 |
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| 引用本文： | 陆孙杰,王惠梅,杨瑞芳,张晓波,凃巨民.酵母双杂交筛选水稻OsMADS15互作蛋白[J].农业生物技术学报,2013,21(2). |
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| 作者姓名： | 陆孙杰 王惠梅 杨瑞芳 张晓波 凃巨民 |
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| 作者单位： | 浙江大学农业与生物技术学院,杭州,310058 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863)项目 |
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| 摘 要： | 蛋白间的相互作用对于生物学功能的发挥是非常重要的.MA DS-box基因的功能主要通过形成同源或异源二聚体或四聚体来实现.水稻OsMA DS15是一个AP1/SQUA亚家族的成员,在水稻开花时间调控、不定根的发育、茎的生长和内稃的发育等过程中具有重要作用,但与之有相互作用的蛋白却知之甚少.本实验用酵母双杂交法从水稻(Oryza sativa ssp.japonica)cDNA文库中筛选与OsMA DS15有相互作用的蛋白.构建了pGB KT7-OsMA DS15诱饵表达载体,然后与pGADT7-cDNA library共转化到酵母(Saccharomyces cerevisiae)AH109中,通过顺序筛选HIS3、A DE2和LacZ3个报告基因的表达,共得到25个UniGene.在烟草(Nicotiana benthamiana)细胞中用BIFC实验验证OsMADS15和候选基因OsMA DS1、OsMA DS14、Os MA DS8之间的相互作用,结果表明在烟草细胞的核内,OsMADS15相连的nYFP可以与OsMA DS1、OsMA DS14、Os MA DS8相连的cYFP分别形成互补而产生荧光,证实其间在植物体内也具有相互作用.本实验为今后近一步研究OsMADS15在水稻花发育和水稻营养器官生长发育中的功能提供了基础资料.
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| 关 键 词： | 水稻 OsMADS15 酵母双杂交 cDNA文库 BIFC |
Screening of Rice OsMADS15 Interacting Proteins by Yeast Two Hybrid System |
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| LU Sun-Jie
,
WANG Hui-Mei
,
YANG Rui-Fang
,
ZHANG Xiao-Bo
,
TU Ju-Min.Screening of Rice OsMADS15 Interacting Proteins by Yeast Two Hybrid System[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2013,21(2). |
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| Authors: | LU Sun-Jie WANG Hui-Mei YANG Rui-Fang ZHANG Xiao-Bo TU Ju-Min |
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