| 高效表达dsRNA大肠杆菌BL21 RNase Ⅲ- 的构建 |
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| 引用本文： | 卢从德,王代钢,杨金宏,禚苏.高效表达dsRNA大肠杆菌BL21 RNase Ⅲ- 的构建[J].中国农学通报,2009,25(22):79-82. |
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| 作者姓名： | 卢从德 王代钢 杨金宏 禚苏 |
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| 作者单位： | 安康学院,陕西省蚕桑重点实验室,陕西安康,725000 |
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| 基金项目： | 陕西省自然科学基金项目，陕西省13115重大科研项目 |
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| 摘 要： | 为了寻找一种简洁、高效的dsRNA获得方式,降低RNAi技术的生产应用成本。应用PKD46介导的重组系统,将PKD46转入大肠杆菌BL21菌株体内,在L-阿拉伯糖的诱导下,产生重组蛋白,使宿主菌具有同源重组的能力,应用两端具有RNase Ⅲ基因40 bp同源序列的PCR产物对其染色体上的RNase Ⅲ基因进行了基因敲除,并在具有卡那霉素的LB平板上筛选到重组菌株。获得了一株能够利用IPTG诱导高效合成dsRNA的BL21 RNase Ⅲ-菌株,为进一步降低RNAi技术的生产应用成本奠定了基础。
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| 关 键 词： | 同源重组 大肠杆菌 双链RNA RNase Ⅲ基因 |
| 收稿时间： | 7/1/2009 12:00:00 AM |
| 修稿时间： | 2009/7/20 0:00:00 |
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