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柑橘无标记转基因转化体系的建立
引用本文:李琳洁,杨莉,李芳,谢玉明,曾柏全,邓子牛.柑橘无标记转基因转化体系的建立[J].湖南农业大学学报(自然科学版),2010,36(6):649-652.
作者姓名:李琳洁  杨莉  李芳  谢玉明  曾柏全  邓子牛
作者单位:湖南农业大学园艺园林学院,湖南农业大学园艺园林学院,湖南农业大学园艺园林学院,湖南农业大学园艺园林学院,中南林业科技大学生命科学与技术学院,国家柑橘改良中心长沙分中心
基金项目:国家农业部"948"专项,国家转基因专项,作物种质创新与资源利用重点实验室科学基金开放项目
摘    要:采用1个结合化学诱导系统XVE和位点专一性重组系统Cre/LoxP的标记基因剔除载体,对柑橘进行无标记转基因研究.此载体可通过β-雌二醇诱导表达系统控制重组酶系统Cre基因表达来剔除标记基因nptⅡ.将侵染后糖橙节间茎段接种在(MS+3mg/LBA)培养基上,共培养(暗培养)3d后转移到筛选培养基(MS+75mg/LKan+500mg/LCef)中.在筛选抗性再生芽后,切下带1~2mm外植体的抗性芽,转移至含有β-雌二醇的化学诱导培养基(MS+3mg/LBA+500mg/L头孢霉素+2μmol/Lβ-雌二醇)上诱导,15d后用荧光显微镜观察,成功观测到绿色荧光.进行试管嫁接,30d后,提取接穗基因组DNA进行PCR扩增,检测到DNA的切除现象.研究结果表明此化学诱导切除标记基因系统应用在柑橘上是可行的.

关 键 词:柑橘  无标记转基因体系  化学诱导  标记基因  β-雌二醇
收稿时间:2010/4/22 0:00:00
修稿时间:2010/10/28 0:00:00

Marker-free transgenic system of Citrus
Li Lin Jie,Yang Li,Li Fang,Xie Yu Ming,Zeng Bo Quan and Deng Zi Niu.Marker-free transgenic system of Citrus[J].Journal of Hunan Agricultural University,2010,36(6):649-652.
Authors:Li Lin Jie  Yang Li  Li Fang  Xie Yu Ming  Zeng Bo Quan and Deng Zi Niu
Institution:Horticulture and landscape college, Hunan Agricultural University,Horticulture and landscape college, Hunan Agricultural University,Horticulture and landscape college, Hunan Agricultural University,Horticulture and landscape college, Hunan Agricultural University,Central South University of Forestry & Technology,National Center for Citrus Improvement
Abstract:
Keywords:
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