蝴蝶兰花器官冰冻切片技术探讨 |
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引用本文: | 陆振芳,蒋素华,江敏,韩世明.蝴蝶兰花器官冰冻切片技术探讨[J].河南农业大学学报,2019,53(2). |
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作者姓名: | 陆振芳 蒋素华 江敏 韩世明 |
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作者单位: | 六盘水师范学院生物科学与技术学院,贵州 六盘水,553000;郑州师范学院生物工程研究所,河南 郑州,450044 |
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基金项目: | 创新团队支持计划;贵州省教育厅项目;贵州省教育厅项目;六盘水市科技局项目;六盘水市科技局项目 |
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摘 要: | 通过对蝴蝶兰的子房、花瓣、唇瓣和合蕊柱进行切片,建立了蔗糖保护-液氮冷冻的冰冻切片技术体系。将蝴蝶兰花器官经过蔗糖磷酸缓冲液保护液处理后抽真空,再经过液氮速冻、固定、包埋、切片、展片观察、染色以及拍照,制作出蝴蝶兰花器官较完整的显微结构切片。研究结果表明,蝴蝶兰花器官冰冻切片最适条件为:(1)蔗糖磷酸缓冲液处理的最适质量分数为子房4%,花瓣8%,唇瓣4%,合蕊柱16%;(2)最适切片厚度为子房15μm,花瓣10μm,唇瓣20μm,合蕊柱10μm;(3)子房、花瓣和唇瓣最适染色方法均为番红单染色法,合蕊柱最适染色方法为番红-固绿双染色法,4种花器官均不适合单独使用固绿染色。
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关 键 词: | 蝴蝶兰 花器官 液氮冷冻 冰冻切片技术 |
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