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毕赤酵母工程菌表达人白细胞介素-2突变体发酵条件的优化
引用本文:易巧,宋小双,朱祥伟,刘堰.毕赤酵母工程菌表达人白细胞介素-2突变体发酵条件的优化[J].西南农业大学学报,2008,30(1):85-90.
作者姓名:易巧  宋小双  朱祥伟  刘堰
作者单位:西南大学生命科学学院,重庆400715
基金项目:中国博士后基金资助项目(2005037721); 重庆市自然科学基金资助项目CSTC(2007BB5353)
摘    要:巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)工程菌(KM71/pPIC9K-MvhIL-2,本室构建)能分泌表达三突变体人白细胞介素-2(MvhIL-2),突变位点分别为125 Cys→Ala;18leu→Met;19leu→Ser.通过对其发酵条件的研究,探索重组人白细胞介素-2突变体工程菌KM71/pPIC9K-IL-2的生长及产物表达规律,通过3因素(即:发酵液起始pH值、甲醇诱导浓度、诱导时间)从3个不同水平上进行正交试验,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,得出摇瓶发酵表达MvhIL-2的最佳条件:发酵液初始pH 6.0,甲醇诱导浓度为0.5%,诱导72 h,最终使目的产物达到菌体总蛋白的30%以上,表达的MvhIL-2考马斯亮蓝染色条带最明显,为其进一步上发酵罐,大量生产重组人白细胞介素-2奠定了基础.

关 键 词:毕赤酵母  人白细胞介素-2突变体  正交试验
文章编号:1673-9868(2008)01-0085-06
收稿时间:2007-09-11
修稿时间:2007年9月11日

Optimization of Conditions to Stabilize and Maximize Pichia pastoris Fermentation of Recombinant Mutant Interleukin-2
YI Qiao, SONG Xiao-shuang, ZHU Xiang-wei, LIU Yan.Optimization of Conditions to Stabilize and Maximize Pichia pastoris Fermentation of Recombinant Mutant Interleukin-2[J].Journal of Southwest Agricultural University,2008,30(1):85-90.
Authors:YI Qiao  SONG Xiao-shuang  ZHU Xiang-wei  LIU Yan
Abstract:
Keywords:Pichia pastroris  expression human interleukin-2 mutant  orthogonal test
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