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建兰花叶病毒TGB1基因的原核表达及多克隆抗体制备
引用本文:李明健,洪鲲,牛晓娟,乙引,万晴姣.建兰花叶病毒TGB1基因的原核表达及多克隆抗体制备[J].广东农业科学,2014,41(19):146-149.
作者姓名:李明健  洪鲲  牛晓娟  乙引  万晴姣
作者单位:1. 贵州师范大学生命科学学院,贵州贵阳,550001
2. 贵州师范大学生命科学学院,贵州贵阳550001;贵州省植物生理与发育调控重点实验室,贵州贵阳550001
基金项目:教育部长江学者和创新团队发展计划项目,贵州省重点实验室项目,贵阳市星火计划项目,贵州省社发攻关项目,贵州省农业攻关项目,贵州省科技联合基金
摘    要:以GenBank中的CyMV-TGB1 (GenBank登录号:HQ681906.1)基因全序列设计1对特异性引物,采用RT-PCR从感染建兰花叶病毒的白花刺果曼陀罗叶片总RNA扩增出该病毒的TGB1基因.测序结果表明,该TGB1基因全长702 bp,编码233个氨基酸残基.构建了原核表达载体pET32a(+)-TGB1,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),在25℃以1.0 mmol/L IPTG诱导表达重组蛋白基因.SDS-PAGE分析表明,重组蛋白分子量约为44 ku,与预测相符.以该重组蛋白为抗原免疫新西兰大白兔,制备的抗体效价达1:25 600.

关 键 词:建兰花叶病毒  TGB1  原核表达  多克隆抗体

Prokaryotic expression of TGB1 gene of Cymbidium mosaic virus and preparation of polyclonal antibodies against the recombinant TGB1
LI Min-jian,HONG Kun,NIU Xiao-juan,YI Yin,WAN Qing-jiao.Prokaryotic expression of TGB1 gene of Cymbidium mosaic virus and preparation of polyclonal antibodies against the recombinant TGB1[J].Guangdong Agricultural Sciences,2014,41(19):146-149.
Authors:LI Min-jian  HONG Kun  NIU Xiao-juan  YI Yin  WAN Qing-jiao
Abstract:
Keywords:Cymbidium mosaic virus  TGB1  prokaryotic expression  polyclonal antibodies
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