RT—PCR及RFLP分析技术对鸡传染性支气管炎病毒的诊断和S1基因分型的研究 |
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引用本文: | 磨美兰 李康然 等. RT—PCR及RFLP分析技术对鸡传染性支气管炎病毒的诊断和S1基因分型的研究[J]. 中国预防兽医学报, 2001, 23(4): 277-282 |
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作者姓名: | 磨美兰 李康然 等 |
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作者单位: | 磨美兰(广西大学动物科技学院,南宁,530005) 李康然(广西大学动物科技学院,南宁,530005) 韦平(广西大学动物科技学院,南宁,530005) |
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基金项目: | 广西区教育厅科学基金资助项目 |
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摘 要: | 本研究使用分别扩增整个S1整个S1糖蛋白基因(引物A)和S1糖蛋白基因N-端高变区I(引物B)的2对引物对3个IBV标准株M41、Connecticut、Arkansas及5个地方分离株(C60,D41A,D41B,A1121,A1171)进行RT-PCR扩增,用引物A时,有5个IBV毒株扩增到目的片段(1720bp);用引物B时,所有8个IBV毒株均得到与预丈夫大小相符的目的产物(228bp),对1720bp的PCR产物用限制性内切酶HaeⅢ进行酶切,结果得出3个不同的RFLP图谱,其中M41、Connecticut、D41B具有相同的HacⅢ酶切图谱,Arkansas和D41A则分别具有互不相同的图谱;对228bp的PCR产物进行DdeI、RsaI限制性内切酶消化,根据它们的RFLP图谱,8个IBV毒株可分为5个基因型,综合2对引物的PCR产物的PCR产物的RFLP分析结果,8个IBV毒株可分为7个基因型,分型的结果与传统的血清学方法吻合,本研究建立的方法和技术具有快速、简单、特异灵敏等优点,为现场流行毒株的定型(基因型/血清型)及其S1基因变异的跟踪研究以及更有效防制传染性支气管炎奠定了基础。
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关 键 词: | 鸡传染性支气管炎病毒 S1基因 反转录酶多聚酶链反应 限制性片段多态性分析 分型 |
文章编号: | 1008-0589(2001)04-0277-06 |
修稿时间: | 2000-11-06 |
Diagnosis of IBV and Typing of the |
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