| HarpinXooc蛋白在毕赤酵母中的分泌表达及其生物活性检测 |
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| 引用本文： | 何丹,刘俊,高学文,沈波. HarpinXooc蛋白在毕赤酵母中的分泌表达及其生物活性检测[J]. 中国生物防治, 2008, 24(1): 46-52 |
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| 作者姓名： | 何丹 刘俊 高学文 沈波 |
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| 作者单位： | 南京农业大学农业部病虫监测与治理重点实验室,南京,210095 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 , 国家高技术研究发展计划(863计划) , 教育部高等学校博士学科点专项科研基金 |
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| 摘 要： | 采用PCR方法从水稻细菌性条斑病菌RS105菌株中扩增harpinXooc编码基因hrf2,将其克隆到酵母表达载体pPICZαA的分泌信号肽基因下游,获得重组表达质粒pPICZαA-hrf2。重组表达质粒线性化后电击转化至毕赤酵母宿主菌X-33,经抗生素Zeocin筛选和PCR鉴定后,得到重组酵母菌X-33/pPICZαA-hrf2。用甲醇诱导重组酵母菌表达目标蛋白,发酵上清液经浓缩后进行SDS-PAGE电泳分析,在约18kD处有特异目标条带出现。Western blot检测表明表达产物具有良好的抗原性。生物活性检测表明酵母重组表达蛋白harpinXooc能够诱导烟草产生过敏反应和促进烟草生长,活性高于在大肠杆菌中表达的harpinXooc。
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| 关 键 词： | 毕赤酵母 HarpinXooc蛋白 生物活性检测 重组表达蛋白 毕赤酵母 分泌表达 生物活性检测 Detection Bioactivity Pichia pastoris 大肠杆菌 烟草生长 过敏反应 抗原性 Western blot 电泳分析 上清液 发酵 目标 甲醇诱导 重组酵母菌 筛选 |
| 文章编号： | 1005-9261（2008）01-0046-07 |
| 收稿时间： | 2007-04-11 |
| 修稿时间： | 2007-04-11 |
Secreted Expression of HarpinXooc in Pichia pastoris and Its Bioactivity Detection |
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| HE Dan,LIU Jun,GAO Xue-wen,SHEN Bo. Secreted Expression of HarpinXooc in Pichia pastoris and Its Bioactivity Detection[J]. Chinese Journal of Biological Control, 2008, 24(1): 46-52 |
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| Authors: | HE Dan LIU Jun GAO Xue-wen SHEN Bo |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pichia pastoris harpinXooc bioactivity detection |
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