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| 以GPT和GFP为双重筛选标记的禽痘病毒转移载体的构建及鉴定 | |
| 引用本文： | 王艳丽,李俊辉,姜永萍,夏俊,裴磊,冉多良,陈化兰.以GPT和GFP为双重筛选标记的禽痘病毒转移载体的构建及鉴定[J].中国预防兽医学报,2009,31(7). |
| 作者姓名： | 王艳丽 李俊辉 姜永萍 夏俊 裴磊 冉多良 陈化兰 |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;新疆农业大学,动物医学院,新疆,乌鲁木齐,830052 2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 3. 新疆农业大学,动物医学院,新疆,乌鲁木齐,830052 |
| 基金项目： | "十一五"国家科技支撑计划项目 |
| 摘 要： | 为研制和开发以禽痘病毒为载体的重组病毒疫苗,本研究构建了禽痘病毒通用转移载体pSY681-gfp-gpt,该载体含有gfp和gpt2种报告基因及背对的痘苗病毒晚期启动子P11和早期启动子P7.5,P11启动gfp和gpt两个基因,P7.5用于启动外源基因,在早期启动子P7.5下游引入NotⅡ和AftⅡ两个酶切位点.用于外源基因的插入.为检测禽痘病毒转移载体pSY681-gfp-gpt的有效性,将H9亚型禽流感病毒A/Chicken/Shanghai/10/01(H9N2)的HA基因插入到该载体中构建转移载体pSY681-gfp-gpt-HA9,将转移载体转染已感染禽痘病毒S-FPV-017的鸡胚成纤维细胞,利用gfp和gpt同时进行双重筛选、数轮蚀斑纯化后获得了重组病毒rFPV-gpt-gfp-HA9,通过PCR、western blot鉴定,结果证明,获得了能稳定表达H9亚型禽流感病毒HA蛋白的重组禽痘病毒rFPV-gpt-gfp-HA9,为今后重组禽痘病毒活载体疫苗的研制奠定了基础. |
| 关 键 词： | 重组禽痘病毒 绿色荧光蛋白 黄嘌呤鸟嘌呤磷酸转移酶 HA基因 |
Construction and identification of a fowlpox virus transfer vector |
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| WANG Yan-li,LI Jun-hui,JIANG Yong-ping,XIA Jun,PEI Lei,RAN Duo-liang,CHEN Hua-lan.Construction and identification of a fowlpox virus transfer vector[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2009,31(7). | |
| Authors: | WANG Yan-li LI Jun-hui JIANG Yong-ping XIA Jun PEI Lei RAN Duo-liang CHEN Hua-lan |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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