| 甜瓜“Piel de Sapo”TILLING平台的测序 |
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| 作者姓名： | 徐美红 闫景景 陆文玉 等 |
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| 作者单位： | 1. 上海交通大学农业与生物学院,上海,200240
2. 闵行区蔬菜技术服务推广中心,上海,201104 |
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| 基金项目： | National Institute for Agricultural Research，France，Research Centre Juelich-Project Management Juelich (FZJ-PTO) on behalf of the Federal Ministry of Education and Research，Germany，Ministry for Education and Science，Spain |
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| 摘 要： | TILLING(Targeting Induced Local Lesions In Genomes)即定向诱导基因组局部突变技术,是一种全新的反向遗传学方法,它借助高通量的检测手段,能够快速有效地从化学诱变剂(EMS)诱变的群体中鉴定出点突变。在TILLING技术中,突变位点的测序检测、EMS诱变群体的构建、目的基因及片段的筛选、碱基错配内切酶的选择都是该技术的核心内容。在甜瓜"Piel deSapo"TILLING平台的构建中,PCR产物直接测序和克隆测序2种方法用于检测8个突变家系的碱基变化。在直接测序中,4个突变家系的测序结果清晰,能够确认碱基的变化,其他4个家系的结果不清晰,不能确认碱基的改变。在克隆测序中,8个家系的测序结果均清晰,能够直接确定目的基因的点突变。在2种方法的比较中,克隆测序的准确率、效率明显优于直接测序法。
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| 关 键 词： | 甜瓜 测序 引物 克隆 |
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