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雌激素调控的绿色荧光蛋白在酵母细胞中的表达
引用本文:李湘鸣,罗方妮,陈春波,张唯立,吴玉娟,祝娉婷.雌激素调控的绿色荧光蛋白在酵母细胞中的表达[J].扬州大学学报(农业与生命科学版),2006,27(2):63-67.
作者姓名:李湘鸣  罗方妮  陈春波  张唯立  吴玉娟  祝娉婷
作者单位:1. 扬州大学,医学院,江苏,扬州,225001
2. 扬州大学,动物科学与技术学院,江苏,扬州,225009
3. 扬州大学,兽医学院,江苏,扬州,225009
基金项目:国家教育部留学回国人员科研启动基金资助项目(PK0407149),江苏省高校自然科学基金资助项目(03KJB610168),江苏省卫生厅医学科技发展基金资助项目(Z200328)
摘    要:采用绿色荧光蛋白(GFP)作为报告基因,用酵母细胞构建环境雌激素(EEH)的评价体系,可敏感、快速、方便地筛选出EEH化合物。通过分子生物学技术,将GFP基因插入到pM P 206/ERE启动子CYC 1的下游,用GFP取代L ac Z基因,并转化于酵母细胞。DNA测序发现ERE-CYC 1-GFP框架正确。对转化子进行PCR鉴定,发现有雌激素受体基因(hER cDNA)和GFP基因特异条带,说明hER cDNA和GFP已重组于酵母细胞。荧光显微镜下发现大量的绿色荧光颗粒,表明GFP基因在酵母细胞中成功表达。酵母细胞经不同浓度雌二醇作用后,与GFP表达量有剂量效应关系。与其他酵母评价体系相比,以GFP为报告基因评价EEH不需要破坏细胞壁,也不需要底物,可在96孔板中完成,这为高通量筛选EEH化合物奠定了基础。

关 键 词:环境雌激素  酵母细胞  基因重组  绿色荧光蛋白
文章编号:1671-4652(2006)01-0063-05
修稿时间:2005年8月30日

The expression of green fluorescent protein regulated by estrogen hormone in yeast cell
LI Xiang-ming,LUO Fang-ni,CHEN Chun-bo,ZHANG Wei-li,WU Yu-juan,ZHU Ping-ting.The expression of green fluorescent protein regulated by estrogen hormone in yeast cell[J].Journal of Yangzhou University:Agricultural and Life Science Edition,2006,27(2):63-67.
Authors:LI Xiang-ming  LUO Fang-ni  CHEN Chun-bo  ZHANG Wei-li  WU Yu-juan  ZHU Ping-ting
Abstract:
Keywords:environmental estrogen  yeast cell  gene recombination  green fluorescent protein
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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