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| 猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白在重组牛痘病毒中的表达与鉴定 | |
| 引用本文： | 张维军,田野,林燕,王群,徐青元,孙庆歌,刘霓红,杨涛,田志军,步志高,童光志,李文京,吴东来. 猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白在重组牛痘病毒中的表达与鉴定[J]. 中国预防兽医学报, 2010, 32(10). DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2010.10.01 |
| 作者姓名： | 张维军 田野 林燕 王群 徐青元 孙庆歌 刘霓红 杨涛 田志军 步志高 童光志 李文京 吴东来 |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,农业部兽医公共卫生重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨150001 2. 中国农业科学院上海兽医研究所,上海,200241 3. 中国动物疫病预防控制中心,北京,100125 |
| 基金项目： | 国家863 计划，黑龙江省自然科学基金重点项目 |
| 摘 要： | 为重组表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白,本研究将RT-PCR获得的PRRSV CH-1a株M蛋白基因,克隆于pMD18-T载体中,经测序鉴定正确后,亚克隆至牛痘病毒重组转移质粒pSC11中,构建了转移重组质粒pSC11-PRRSV-M。将pSC11-PRRSV-M在脂质体的介导下转染WR株牛痘病毒感染的TK-143细胞,在含有X-gal的琼脂培养基上通过蓝斑筛选含有PRRSV M基因的重组病毒rWR-PRRSV-M。Western blot与IFA检测表明,重组病毒成功表达了PRRSV M蛋白,而且所表达的蛋白保持了良好的免疫原性。动物实验表明,rWR-PRRSV-M所表达的PRRSV M蛋白在免疫小鼠体内诱生了抗PRRSV的抗体。rWR-PRRSV-M的构建,为进一步探讨PRRSV M蛋白免疫原性提供了基础数据,也为PRRS重组活载体疫苗的研究奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 M蛋白 重组牛痘病毒 |
Construction of recombinant vaccinia virus expressing porcine reproductive and respiratory syndrome virus M protein |
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| ZHANG Wei-jun,TIAN Ye,LIN Yan,WANG Qun,XU Qing-yuan,SUN Qing-ge,LIU Ni-hong,YANG Tao,TIAN Zhi-jun,BU Zhi-gao,TONG Guang-zhi,LI Wen-jing,WU Dong-lai. Construction of recombinant vaccinia virus expressing porcine reproductive and respiratory syndrome virus M protein[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2010, 32(10). DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2010.10.01 | |
| Authors: | ZHANG Wei-jun TIAN Ye LIN Yan WANG Qun XU Qing-yuan SUN Qing-ge LIU Ni-hong YANG Tao TIAN Zhi-jun BU Zhi-gao TONG Guang-zhi LI Wen-jing WU Dong-lai |
| Affiliation: | ZHANG Wei-jun1,TIAN Ye1,LIN Yan1,WANG Qun1,XU Qing-yuan1,SUN Qing-ge1,LIU Ni-hong1,YANG Tao1,TIAN Zhi-jun1,BU Zhi-gao1,TONG Guang-zhi2,LI Wen-jing3,WU Dong-lai1(1.State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Key Laboratory of Veterinary Public Health,Ministry of Agricultural,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150001,China,2.Shanghai Veterinary Research Institute,Shanghai 200241,3.Chinese Animal Disease Preve... |
| Abstract: | In this study,the M gene of Porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV) CH-1a strain was amplified from the PRRSV genome by RT-PCR and cloned into the plasmid pSC11.The recombinant plasmid pSC11-PRRSV-M was transfected into TK-143 cells infected with vaccinia virus WR strain.Recombinants vaccinia virus of rWR-PRRSV-M was obtained by selecting blue plaques on the TK-143 cells overlaid with agar containing X-gal,and confirmed by PCR.The M gene expressed in TK-143 cells were identified by SDS-PA... |
| Keywords: | porcine reproductive and respiratory syndrome virus M protein recombinant vaccinia virus |
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