嵌合双串联OVA T细胞表位的RHDV VP60蛋白免疫特性研究 |
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引用本文: | 宋艳华,张燕,胡波,范志宇,魏后军,刘星,黄兵,薛家宾,徐为中. 嵌合双串联OVA T细胞表位的RHDV VP60蛋白免疫特性研究[J]. 安徽农业科学, 2015, 43(32): 89-92. DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2015.32.030 |
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作者姓名: | 宋艳华 张燕 胡波 范志宇 魏后军 刘星 黄兵 薛家宾 徐为中 |
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作者单位: | 江苏省农业科学院兽医研究所,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014;山东省农业科学院家禽研究所,山东济南,250023 |
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基金项目: | 江苏省自然科学基金项目(BK20140740),现代农业产业技术体系建设专项(CARS-44),山东省现代农业产业技术体系项目(SDAIT-18-011-06) |
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摘 要: | 为研究RHDV VP60作为载体容纳外源片段以及递呈外源T细胞表位的能力,将双串联卵清蛋白T细胞表位插入N端、C端以及替代N端氨基酸的方式获得3种嵌合蛋白,进行免疫试验。3种嵌合蛋白分别命名为DN1、DN2和DC,将蛋白进行浓缩、纯化及定量,利用透射电镜观察VLPs的形成,发现均可形成形态大小与VP60相似的VLPs。将3种嵌合蛋白分别腹腔注射C57BL/6雌性小鼠,利用间接ELISA检测首免后0、4和6周小鼠血清样品中VP60特异性抗体,结果表明嵌合蛋白组与VP60组均能够诱导产生较高水平的抗VP60特异性抗体,2组间无显著差异。首免后6周,利用合成的OVA多肽刺激脾淋巴细胞,ELISPOT检测特异性IFN-γ的分泌水平,结果表明3种嵌合蛋白均能诱导特异性IFN-γ的分泌。该研究扩展了VP60作为载体可携带的外源片段的耐受性及有效递呈T细胞表位的能力,为VP60-VLPs展示系统的研究提供了理论依据。
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关 键 词: | RHDV 衣壳蛋白 OVA T细胞表位 嵌合蛋白 免疫原性研究 |
Immunogenicity of Chimeric RHDV VP60 Protein Carrying Double CD8+ T Cell Epitopes of OVA |
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Abstract: | |
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Keywords: | Rabbit hemorrhagic disease virus Capsid protein (VP60) OVA T-cell epitope Chimeric protein Immunogenicity |
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