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黄姑鱼锰超氧化物歧化酶基因的克隆及氨氮和亚硝态氮胁迫对其表达的影响
引用本文:王小龙,宋青,王志勇,韩芳. 黄姑鱼锰超氧化物歧化酶基因的克隆及氨氮和亚硝态氮胁迫对其表达的影响[J]. 水产学报, 2019, 43(4): 820-832
作者姓名:王小龙  宋青  王志勇  韩芳
作者单位:集美大学水产学院, 农业农村部东海海水健康养殖重点实验室, 福建 厦门 361021,西北工业大学柔性电子研究院, 陕西 西安 710072,集美大学水产学院, 农业农村部东海海水健康养殖重点实验室, 福建 厦门 361021,集美大学水产学院, 农业农村部东海海水健康养殖重点实验室, 福建 厦门 361021
基金项目:国家海水鱼类产业技术体系专项(CARS-47-G04);福建省科技厅重大专项(2018N5010);福建省自然科学基金(2018J01450,2019J01693)
摘    要:锰超氧化物歧化酶(MnSOD)是一种含金属辅基的抗氧化酶,广泛存在于各种需氧生物中,能将氧自由基快速歧化为分子氧(O_2)和过氧化氢(H_2O_2)。本研究首次获得了黄姑鱼MnSOD基因的cDNA序列,其全长958 bp,包括47 bp的5′端非编码区(untranslated region,UTR)、233 bp的3′UTR和678 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),编码225个氨基酸残基(aa)。氨基酸序列分析显示,MnSOD含有一条信号肽序列(1~27 aa),4个Mn结合位点(His 53、101、190和Asp 186)和一条保守的锰/铁SOD特征序列(186~193 aa)。系统进化树分析显示,黄姑鱼MnSOD在进化上与大黄鱼最近,并与其他鱼类(斜带石斑鱼、暗纹东方鲀、牙鲆、斑马鱼和日本鳗鲡)聚为一支。荧光定量PCR检测显示,MnSOD基因在所检测的11个黄姑鱼组织/器官中均有表达,其中心脏中表达量最高,其次为脑、肝脏、鳃、中肾、肠、胃、头肾、肌肉和鳔,在脾脏中表达量最低。氨氮和亚硝态氮对黄姑鱼的急性毒性实验显示,黄姑鱼对氨氮胁迫更为敏感,其氨氮和亚硝态氮的96 h半致死浓度(LC50)分别为20.23 mg/L (换算成非离子氨0.57 mg/L)和99.08 mg/L,安全浓度分别为2.02 mg/L (换算成非离子氨0.06 mg/L)和9.91 mg/L。此外,黄姑鱼经氨氮和亚硝态氮急性攻毒后,其肝脏、鳃和头肾中MnSOD基因的表达水平均不同程度上调,推测MnSOD的上调是为了及时清除由氨氮和亚硝态氮刺激产生的氧自由基,或可用作水体污染检测的早期生物标志物。

关 键 词:黄姑鱼  锰超氧化物歧化酶  氨氮  亚硝态氮
收稿时间:2018-01-17
修稿时间:2018-05-19

Cloning of manganese superoxide dismutase gene and expression analysis in response to ammonia and nitrite challenge in Nibea albiflora
WANG Xiaolong,SONG Qing,WANG Zhiyong and HAN Fang. Cloning of manganese superoxide dismutase gene and expression analysis in response to ammonia and nitrite challenge in Nibea albiflora[J]. Journal of Fisheries of China, 2019, 43(4): 820-832
Authors:WANG Xiaolong  SONG Qing  WANG Zhiyong  HAN Fang
Affiliation:Key Laboratory of Healthy Mariculture for the East China Sea, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Fisheries College, Jimei University, Xiamen 361021, China,Institute of Flexible Electronics, Northwestern Polytechnical University, Xi''an 710072, China,Key Laboratory of Healthy Mariculture for the East China Sea, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Fisheries College, Jimei University, Xiamen 361021, China and Key Laboratory of Healthy Mariculture for the East China Sea, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Fisheries College, Jimei University, Xiamen 361021, China
Abstract:
Keywords:Nibea albiflora  MnSOD  ammonia nitrogen  nitrite nitrogen
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