| 牛c-Myc/TAT/9R融合表达载体构建及其原核表达研究 |
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| 引用本文： | 甘鹏,熊亮,贾文超,潘传英,蓝贤勇,陈宏.牛c-Myc/TAT/9R融合表达载体构建及其原核表达研究[J].家畜生态,2013(10):10-15. |
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| 作者姓名： | 甘鹏 熊亮 贾文超 潘传英 蓝贤勇 陈宏 |
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| 作者单位： | [1]西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌712100 [2]中山大学生命科学学院,广东广州510275 [3]西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（No.31000655）;西北农林科技大学博士启动基金（BSJJ2010049） |
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| 摘 要： | 原癌基因c-Myc虽然在许多肿瘤组织中特异性高表达,但它也是机体正常细胞生长与增殖所必需的因子,然而目前家畜诱导多潜能干细胞（iPS）研究中关于多功能转录因子c-Myc的报道很少.为此,研究拟利用蛋白转导区域（PTD）的跨膜作用,构建TAT-bc-Myc-9R融合表达载体,并对其进行原核表达,旨在为转录因子蛋白重编程牛体细胞奠定基础.试验以牛c-Myc基因编码区序列为参考,设计并合成含酶切位点、跨膜转导肽TAT和9R的引物,利用PCR等基因工程方法获得包括牛c-Myc、TAT和9R的重组原核表达载体（pTAT-HA-bc-Myc-9R）;酶切鉴定和DNA测序结果表明,试验成功获得bc-Myc-9R重组序列,成功构建重组质粒pTAT-bc-Myc-9R;不同IPTG浓度和诱导时间条件对该重组载体的诱导表达和SDS-PAGE分析表明,TAT-bc-Myc-9R在0.6 mmol/L IPTG和37℃诱导6h条件下表达约57KDa的目的蛋白.这些结果为PTD介导的转录因子蛋白直接重编程牛体细胞以获得iPS研究积累了科学资料.
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| 关 键 词： | 牛 诱导多潜能干细胞（iPS） c-Myc基因 TAT 多聚精氨酸（9R） 原核表达 |
The Construction and Prokaryotic Expression of TAT-bc-Myc-9R Fusion Vector in Bovines |
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| GAN Peng,XIONG Liang,JIA Wen-chao,PAN Chuan-ying,LAN Xian-yong,CHEN Hong.The Construction and Prokaryotic Expression of TAT-bc-Myc-9R Fusion Vector in Bovines[J].Ecology of Domestic Animal,2013(10):10-15. |
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| Authors: | GAN Peng XIONG Liang JIA Wen-chao PAN Chuan-ying LAN Xian-yong CHEN Hong |
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| Institution: | 1. College of Life Sciences, Northwest A＆ F University, Yangling , Shaanxi, 712100, China 2. Sun Yat-Sen University, School of Life Sciences, Guangzhou, Guangdong, 510275, China; 3. College of Animal Science and Technology, Northwest A＆F University, Yangling, Shaanxi, 712100, China ) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bovine Induced pluripotent stem cell （iPS） c-Myc gene TAT peptide Poly-（Arg） 9 prokaryotic expression |
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