| 融合蛋白Rv3872/CFP-10/ESAT-6的制备及在牛结核诊断中的初步应用 |
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| 引用本文： | 刘冬光,廖娟红,于清龙,陈颖钰,陈焕春,郭爱珍.融合蛋白Rv3872/CFP-10/ESAT-6的制备及在牛结核诊断中的初步应用[J].中国奶牛,2009(10):7-11. |
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| 作者姓名： | 刘冬光 廖娟红 于清龙 陈颖钰 陈焕春 郭爱珍 |
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| 作者单位： | 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070;华中农业大学动物医学院,武汉,430070 |
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| 基金项目： | "973"计划重要传染病基础研究专项，国家"十一五"科技支撑计划项目，农业公益性行业科研专项 |
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| 摘 要： | 本研究通过融合表达Rv3872、CFP-10和ESAT-6蛋白,以改良牛结核病特异性鉴别诊断抗原CFP-10-ESAT-6,提高牛结核抗体鉴别诊断法的灵敏度。利用PCR方法,克隆牛分枝杆菌RD1区上述三个基因,通过酶切连接方法,将三个基因串联在pET-28a载体上,基因之间用Linker序列连接。融合基因在大肠杆菌内经IPTG0.4mmol/L诱导3h,目的蛋白经SDS-PAGE证实表达在上清中,Western-blot分析证实表达蛋白具有免疫原性。以所表达的融合蛋白作为包被抗原建立间接ELISA,检测了44份牛分枝杆菌感染背景清楚的临床奶牛血清。26份阳性血清中,Rv3872-CFP-10-ESAT-6融合蛋白ELISA检出阳性样本18份,检测灵敏度为69%,而CFP-10-ESAT-6融合蛋白ELISA只检出阳性样本4份。18份阴性血清中,两种ELISA均检出17份阴性血清,特异性都为94%（17/18）。因此,Rv3872-CFP-10-ESAT-6融合蛋白在对牛结核抗体检测特异性没有降低的情况下,敏感性获得了显著提高,这对牛结核病的早期鉴别诊断方法的建立具有重要意义。
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| 关 键 词： | 牛结核 Rv3872 CFP-10 ESAT-6 诊断 |
Preparation of Fusion Protein Rv3872/CFP-10/ESAT-6 and Primary Application in Detection of Bovine Tuberculosis |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Rv3872 CFP-10 ESAT-6 |
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