| 双重一步法RT-PCR检测2种主要兰花病毒 |
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| 引用本文： | 柳爱春,赵芸,刘超,张乐. 双重一步法RT-PCR检测2种主要兰花病毒[J]. 安徽农业科学, 2009, 37(27): 12960-12961 |
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| 作者姓名： | 柳爱春 赵芸 刘超 张乐 |
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| 作者单位： | 杭州市农业科学研究院,浙江杭州,310024;杭州市农业科学研究院,浙江杭州,310024;杭州市农业科学研究院,浙江杭州,310024;杭州市农业科学研究院,浙江杭州,310024 |
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| 基金项目： | 杭州市科技发展计划项目 |
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| 摘 要： | [目的]研究建兰花叶病毒（CymMV）和齿兰环斑病毒（ORSV）双重一步法RT—PCR检测方法，为病毒的早期快速诊断提供技术支持。[方法]根据2种病毒的外壳蛋白基因的保守序列分别设计两对特异性引物，并进行双重与单一RT—PCR对比试验。[结果]结果在健康蜘蛛兰被人工接种病毒后第10天和第21天用一步法RT-PCR方法分别获得CymMV和ORSV与预期相符的约764和946bp扩增产物务带；且双重一步法RT—PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后，出现两务与单一RT—PCR产物相对应的清晰务带，获得较理想的检出效果；扩增产物的核酸序列经BLAST分析，同源性均在85％以上，证实了检测结果的准确性。[结论]该方法具有更加灵敏、特异、快速和简便的特点，适合于两种主要兰花病毒的同时快速检测。
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| 关 键 词： | 建兰花叶病毒 齿兰环斑病毒 双重一步法RT-PCR |
Detection of Two Main Orchid Viruses with the Method of Double One-step RT-PCR |
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| LIU Ai-chun et al. Detection of Two Main Orchid Viruses with the Method of Double One-step RT-PCR[J]. Journal of Anhui Agricultural Sciences, 2009, 37(27): 12960-12961 |
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| Authors: | LIU Ai-chun et al |
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| Affiliation: | LIU Ai-chun et al(Hangzhou Academy of Agricultural Sciences,Hangzhou,Zhejiang 310024) |
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| Abstract: | [Objective] The technical support for the rapid diagnosis of orchard virus in early period was provided through the establishment of the detection method of double one-step RT-PCR for Cymbidium mosaic virus(CymMV) and Odontoglossum ringspot virus(ORSV).[Method] According to the two virus coat protein gene conservative sequence,of two pairs of specific primers were designed,respectively,and the experiment in the double and single RT-PCR were compared.[Results] The results indicated that the 764 bp and 946 bp... |
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| Keywords: | Cymbidium mosaic virus Odontoglossum ringspot virus Double one-step RT-PCR |
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