| 芦笋SRAP反应体系优化及引物筛选 |
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| 引用本文： | 盛文涛,周劲松,汤泳萍,罗绍春,陈光宇.芦笋SRAP反应体系优化及引物筛选[J].分子植物育种,2010,8(3):612-618. |
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| 作者姓名： | 盛文涛 周劲松 汤泳萍 罗绍春 陈光宇 |
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| 作者单位： | 1. 江西省农业科学院生物工程中心,南昌,330200;南昌大学生命科学与食品工程学院,南昌,330200
2. 江西省农业科学院生物工程中心,南昌,330200 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目，江西省自然科学基金项目 |
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| 摘 要： | 本研究以芦笋基因组总DNA为模板,通过对芦笋SRAP反应体系的重要参数进行优化,建立了一套适用于芦笋的SRAP反应体系:25μL的反应体系中,模板DNA量80ng、Mg2+浓度3.0mmol/L、上下游引物各0.2μmol/L、dNTPs0.3mmol/L、Taq DNA聚合酶1U以及1×Buffer。扩增程序为:94℃预变性3min;94℃30s、35℃30s、72℃1.5min,5个循环;然后退火温度提高到50℃,35个循环;最后72℃延伸10min。比较琼脂糖凝胶和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测SRAP扩增产物的多态性,结果发现:6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测扩增产物比琼脂糖的效果好。利用该优化体系筛选引物,从256个SRAP引物组合中筛选出239个,它们具有扩增条带清晰、丰富、重复性好的优点,证明了此优化体系稳定可靠。
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| 关 键 词： | 芦笋 反应体系 优化 引物筛选 |
Optimization of SRAP Reaction System and Selection of Primers for Asparagus officinalis L. |
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| Sheng Wentao,Zhou Jinsong,Tang Yongping,Luo Shaochun,Chen Guangyu.Optimization of SRAP Reaction System and Selection of Primers for Asparagus officinalis L.[J].Molecular Plant Breeding,2010,8(3):612-618. |
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| Authors: | Sheng Wentao Zhou Jinsong Tang Yongping Luo Shaochun Chen Guangyu |
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| Keywords: | SRAP |
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