| 解淀粉芽孢杆菌中性蛋白酶基因的克隆与表达 |
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| 引用本文： | 杜珊珊,王颖,张东杰. 解淀粉芽孢杆菌中性蛋白酶基因的克隆与表达[J]. 黑龙江八一农垦大学学报, 2015, 0(1) |
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| 作者姓名： | 杜珊珊 王颖 张东杰 |
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| 作者单位： | 黑龙江八一农垦大学食品学院,大庆,163319 |
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| 基金项目： | 省农垦总局“十二五”重点科技开发项目(农副产品精深加工及高效利用和贮运技术创新研究于示范HNK13KF-01-01)。 |
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| 摘 要： | 为了获得高效的中性蛋白酶基因,试验用PCR方法从解淀粉芽孢杆菌中扩增中性蛋白酶基因(npr),通过Bam HⅠ、SalⅠ双酶切后,将该基因与表达载体PET-28a连接,同时转入到大肠杆菌BL21中表达,通过SDS-PAGE电泳技术对构建的工程菌的基因表达产物进行分析。获得特异npr基因序列含1 566 bp,编码522个氨基酸,含有完整的ORF,同源性达到100%。蛋白酶的分子量为57.4 k Da。IPTG能诱导中性蛋白酶基因在重组菌进行表达,通过改变IPTG诱导浓度、诱导温度及诱导时间等因素,得出在添加剂IPTG至终浓度为0.8 mmol·L-1,30℃诱导4 h为最佳诱导条件,获得最高酶活为450 U·m L-1。
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| 关 键 词： | 解淀粉芽孢杆菌 中性蛋白酶 大肠杆菌 克隆 诱导表达 |
Cloning and Expression of the Neutral Protease Gene from Bacillus Amyloliquefaciens |
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| Du Shanshan,Wang Ying,Zhang Dongjie. Cloning and Expression of the Neutral Protease Gene from Bacillus Amyloliquefaciens[J]. journal of heilongjiang bayi agricultural university, 2015, 0(1) |
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| Authors: | Du Shanshan Wang Ying Zhang Dongjie |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bacillus amyloliquefaciens neutral protease Escherichia coli clone inducible expression |
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