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| 槭属树种ISSR-PCR反应体系的确立 | |
| 引用本文： | 张冬梅,魏华丽,苏金乐,钱又宇.槭属树种ISSR-PCR反应体系的确立[J].上海农业学报,2008,24(1):51-54. |
| 作者姓名： | 张冬梅 魏华丽 苏金乐 钱又宇 |
| 作者单位： | 1. 上海市园林科学研究所,上海,200232 2. 上海市园林科学研究所,上海,200232;河南农业大学林学园艺学院,郑州,450002 3. 河南农业大学林学园艺学院,郑州,450002 |
| 基金项目： | 上海市绿化管理局(林业局)项目资助(F040202) |
| 摘 要： | 采用改良CTAB法提取槭属树种总DNA,分析了Taq聚合酶、样本浓度、Mg2 浓度、dNTP浓度以及引物浓度对ISSR-PCR扩增结果的影响,用四因素三水平正交法确定了Taq酶浓度、引物浓度、Mg2 浓度、dNTP浓度的最佳组合,并优化模板浓度,建立了稳定、可重复的槭属树种ISSR-PCR最佳反应体系及PCR扩增参数.ISSR-PCR的最佳反应体系为:在10 μL的反应体系内,Taq聚合酶宜加入0.25 U,dNTP最适浓度为0.3mmol/L,模板最适浓度为4 ng/μL,引物最适浓度均为0.5 μmol/L,不同的引物有其各自合适的Mg2 浓度.槭属树种ISSR-PCR引物筛选及反应体系的建立,为利用ISSR标记技术开展槭属树种的系统进化和亲缘关系研究提供一个强有力的工具. |
| 关 键 词： | 槭属树种 ISSR-PCR 反应体系 树种 反应体系 trees system 亲缘关系研究 系统进化 标记技术 ISSR 利用 引物筛选 模板浓度 最适浓度 参数 稳定 优化 组合 最佳 酶浓度 正交法 水平 |
| 文章编号： | 1000-3924(2008)01-51-04 |
| 修稿时间： | 2007年5月15日 |
The establishment of ISSR-PCR system of Acer trees |
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| ZHANG Dong-mei,WEI Hua-li,SU Jin-le,QIAN You-yu.The establishment of ISSR-PCR system of Acer trees[J].Acta Agriculturae Shanghai,2008,24(1):51-54. | |
| Authors: | ZHANG Dong-mei WEI Hua-li SU Jin-le QIAN You-yu |
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