猪场爆发猪繁殖与呼吸综合征的临床诊断及实验检测

摘 要: 猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的猪繁殖和呼吸道接触性传染病。临床特征为母猪流产、死胎和木乃伊胎增多，仔猪出现呼吸道症状和断奶前死亡率增高以及免疫抑制，严重危害种公猪和繁殖母猪及其仔猪。本文参考 GenBank上PRRSV LV和VR-2332毒株核苷酸序列，设计并合成一对特异性引物，以提取来自贵州某猪场猪繁殖与呼吸综合征疑似病料（包括血液、肝、肺、肾、淋巴结、心、脾组织）的总RNA为模版，应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法，经94℃ 预变性2 min；94℃变性45s，60℃退火 1min，72℃延伸1min进行35个循环；72℃ 再延伸10min进行扩增。扩增产物经0.8%琼脂糖凝胶电泳检测，结果表明所扩增的目的DNA条带大小约750bp，与预期大小相似。扩增产物经回收纯化后，应用pMD18－T 载体进行克隆后测序。测序结果表明，所扩增DNA片段大小为739bp，该核苷酸序列与湖南发现的PRRSV序列同源性为100%。本实验说明临床诊断及实验RT-PCR检测方法作为猪繁殖与呼吸综合征的诊断方法是快速有效的，可为猪繁殖与呼吸综合征诊断提供参考依据。

The clinical diagnosis and experiment detection of PRRS of one hogpen