| 青海血蜱cDNA表达文库的构建 |
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| 引用本文： | 高金亮,关贵全,马米玲,刘志杰,党志胜,刘爱红,李文卉,任巧云,罗建勋,殷宏. 青海血蜱cDNA表达文库的构建[J]. 畜牧兽医学报, 2005, 36(11): 1187-1191 |
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| 作者姓名： | 高金亮 关贵全 马米玲 刘志杰 党志胜 刘爱红 李文卉 任巧云 罗建勋 殷宏 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院兰州兽医研究所,兰州,730046 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（30270992）;国家高技术研究发展计划（863计划）（2001AA249081） |
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| 摘 要： | 在无RNA酶污染的环境下摘取半饱血青海血蜱唾液腺、马氏管和卵巢等器官,从中提取RNA,进而纯化mRNA,采用oligo(dT)引物合成双链cDNA,并在其两端加EcoRⅠ/HindⅢ定向接头。将所产生的cDNA分子定向克隆到具有EcoRⅠ/HindⅢ黏性末端的λSCREEN载体的两臂之间。用PhageMaker extract对以上连接产物进行体外包装以形成完整的噬菌体,并用之转染大肠杆菌ER1647,从而构建成青海血蜱的cDNA表达文库。经测定,所构建青海血蜱cDNA文库的库容量约为2×106PFU/mL,重组率为100%,扩增后文库的滴度为8×109PFU/mL。通过对该文库的免疫学筛选,获得一个编码青海血蜱肌球蛋白碱性轻链的全长cDNA序列。所有结果显示,青海血蜱cDNA表达文库已成功构建。
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| 关 键 词： | 青海血蜱 cDNA表达文库 构建 |
| 文章编号： | 0366-6964（2005）11-1187-05 |
| 收稿时间： | 2004-11-08 |
| 修稿时间： | 2004-11-08 |
Construction of cDNA Expression Library of Haemaphysalis qinghaiensis |
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| GAO Jin-liang,GUAN Gui-quan,MA Mi-ling,LIU Zhi-jie,DANG Zhi-sheng,LIU Ai-hong,LI Wen-hui,REN Qiao-yun,LUO Jian-xun,YIN Hong. Construction of cDNA Expression Library of Haemaphysalis qinghaiensis[J]. Chinese Journal of Animal and Veterinary Sciences, 2005, 36(11): 1187-1191 |
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| Authors: | GAO Jin-liang GUAN Gui-quan MA Mi-ling LIU Zhi-jie DANG Zhi-sheng LIU Ai-hong LI Wen-hui REN Qiao-yun LUO Jian-xun YIN Hong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Haemaphysalis qinghaiensis cDNA expression library construction |
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