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用注射器直接对睾丸打点注射EGFP生产转基因兔的试验研究
引用本文:宋天增,冯静,曾宪垠,杨剑波,杨华,皮文辉,张红琳,贾斌,赵宗胜,郭延华,石国庆.用注射器直接对睾丸打点注射EGFP生产转基因兔的试验研究[J].家畜生态学报,2010,31(3):19-23.
作者姓名:宋天增  冯静  曾宪垠  杨剑波  杨华  皮文辉  张红琳  贾斌  赵宗胜  郭延华  石国庆
作者单位:1. 石河子大学动物科技学院,新疆,石河子,832000;新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室,新疆,石河子,832000;四川农业大学原子能农业应用研究室,四川,雅安,625014
2. 新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室,新疆,石河子,832000;新疆农业大学动物科技学院,新疆,乌鲁木齐,830052
3. 四川农业大学原子能农业应用研究室,四川,雅安,625014
4. 石河子大学动物科技学院,新疆,石河子,832000
5. 新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室,新疆,石河子,832000
6. 南京晓庄学院生命科学系,江苏,南京,211171
7. 石河子大学动物科技学院,新疆,石河子,832000;新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室,新疆,石河子,832000
基金项目:国家"863"计划,国家"十一五"科技支撑计划,国家自然科学基金,国家重大转基因专项,现代农业产业技术体系建设专项资金资助 
摘    要:为探讨直接用 1 mL 注射器对睾丸打点注射pIRES2-EGFP建立操作方便、效率高、成本低、可批量生产转基因兔的可行性.选择4只成年新西兰雄兔,双侧睾丸内分别打点注射 0.5~0.8 mg/mL浓度的质粒 0.25 mL,第 3 周和第 8 周分别取4#和3#雄兔睾丸做冰冻切片,置荧光显微镜下观察是否发绿色荧光.其它雄兔于第 3 周开始参与配种,最后采新生仔兔耳组织提取其基因组进行 PCR 和 Southern 杂交检测阳性率.结果表明,雄兔睾丸冰冻切片于荧光显微镜下可见绿色荧光,PCR 和 Southern 杂交检测表明在睾丸注射后的第 6 周和第 7 周进行配种所得后代阳性率最高.不同雄兔后代经 PCR 和 Southern 杂交检测平均阳性率存在差异(P<0.05),2#雄兔后代平均阳性率达到 56.46%,3#雄兔的最低达36.96%的阳性率.表明用注射器直接对睾丸打点注射外源基因生产转基因的方法操作简便、高效,为大规模制备一些大型家畜的转基因后代奠定了基础.

关 键 词:睾丸注射  转基因兔  转基因

Generation of Transgenic Rabbits by Testis Injection with Syringe
SONG Tian-zeng,FENG Jing,ZENG Xian-yin,YANG Jian-bo,YANG Hua,PI Wen-hui,ZHANG Hong-lin,JIA Bin,ZHAO Zong-sheng,GUO Yan-hua,SHI Guo-qing.Generation of Transgenic Rabbits by Testis Injection with Syringe[J].Acta Ecologae Animalis Domastici,2010,31(3):19-23.
Authors:SONG Tian-zeng  FENG Jing  ZENG Xian-yin  YANG Jian-bo  YANG Hua  PI Wen-hui  ZHANG Hong-lin  JIA Bin  ZHAO Zong-sheng  GUO Yan-hua  SHI Guo-qing
Abstract:
Keywords:
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