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普通小麦中国春Chi基因的克隆、染色体定位及原核表达
引用本文:胡周波,高 翔,陈其皎,宋喜悦,陈冬阳,董 剑,赵万春,石引刚. 普通小麦中国春Chi基因的克隆、染色体定位及原核表达[J]. 西北农业学报, 2014, 23(8): 25-33
作者姓名:胡周波  高 翔  陈其皎  宋喜悦  陈冬阳  董 剑  赵万春  石引刚
作者单位:(西北农林科技大学 农学院, 陕西杨凌 712100)
基金项目:“十二五”农村领域国家科技计划课题(2011AA100501);国家现代农业产业技术体系研究项目(CARS-3-2-47);国家自然科学基金(31171538);西北农林科技大学唐仲英育种基金(A212020912)。
摘    要:利用ChiF/ChiR引物组合在普通小麦品种中国春中扩增几丁质酶基因,并对其序列进行分析,然后利用中国春缺四体材料对不同的几丁质酶基因进行染色体定位,并对定位成功的亚基进行原核表达以及诱导纯化,最后通过进化树分析小麦几丁质酶与其他物种几丁质酶之间的进化关系。结果表明,从中国春中分离出的30个几丁质酶基因可以划分为出6类,分别命名为Chi-1、Chi-2、Chi-3、Chi-4、Chi-5和Chi-6,登录号分别为KJ507385、KJ507386、KJ507387、KJ507388、KJ507389和KJ507390,它们都属于ClassⅠ几丁质酶。Chi-1、Chi-2、Chi-3、Chi-4和Chi-6分别定位在小麦的3A、2B、5B、1A和3D染色体,Chi-5定位失败。Chi-1、Chi-2、Chi-3、Chi-4和Chi-6的原核表达和纯化体系成功建立,最后发现小麦ClassⅠ型几丁质酶与水稻和大麦的ClassⅠ型几丁质酶进化关系更近,而与拟南芥的关系最远。总体来看,通过对小麦几丁质酶的克隆、序列分析、染色体定位、原核表达体系的建立以及进化分析,可知,小麦几丁质酶包括很多种不同的亚型,而且它们分布在不同的染色体上,同时它们与水稻和大麦的进化关系最近。

关 键 词:几丁质酶   克隆   序列分析   染色体定位   原核表达

Cloning, Chromosomal Localization and Prokaryotic Expression of Chi Genes from Wheat Cultivar Chinese Spring (Triticum aestivum L.)
HU Zhoubo,GAO Xiang,CHEN Qijiao,SONG Xiyue,CHEN Dongyang,DONG Jian,ZHAO Wanchun and SHI Yingang. Cloning, Chromosomal Localization and Prokaryotic Expression of Chi Genes from Wheat Cultivar Chinese Spring (Triticum aestivum L.)[J]. Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica, 2014, 23(8): 25-33
Authors:HU Zhoubo  GAO Xiang  CHEN Qijiao  SONG Xiyue  CHEN Dongyang  DONG Jian  ZHAO Wanchun  SHI Yingang
Abstract:
Keywords:Chitinase   Cloning   Sequence analysis   Chromosomal localization   Prokaryotic expression
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