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银杏类黄酮3’羟化酶基因的克隆与表达分析
作者姓名:李琳玲  程华  陈小玲  程水源
作者单位:1经济林木种质改良与资源综合利用湖北省重点实验室,湖北黄冈 438000;2武汉轻工大学生物与制药工程学院,武汉 430023;3黄冈师范学院生命科学学院,湖北黄冈438000
基金项目:国家自然科学基金项目(31400556,31270717);湖北省自然科学基金项目(2011CDA117,2013CFB471)
摘    要:利用简并PCR和RACE技术从银杏叶片中分离到黄酮3’羟化酶基因Gb F3’H的c DNA全长序列(Gen Bank No.:KP056747)。其全长为2 144 bp,含有一个1 671 bp的开放式阅读框(ORF),编码556个氨基酸序列,预测氨基酸大小为63.47 k D,等电点为7.71。蛋白质同源序列分析表明,Gb F3’H与其他物种F3’H同源性较低,而与菊苣(Cichorium intybus)同源性最高,为56.3%。同源建模分析显示Gb F3’H与P450家族蛋白的三维结构及活性位点高度相似,最终定位于微粒体膜上。进化树分析结果显示Gb F3’H与其他植物分化较早,序列差异较大。组织表达分析显示,Gb F3’H在银杏不同组织中都有表达,其中雄蕊表达水平最高,其次为成熟叶。诱导表达分析显示,Gb F3’H转录水平受UV-B、6-BA、SA、ABA和IAA影响诱导上调,而伤害处理对其表达量无明显影响。Gb F3’H诱导表达模式与调控银杏黄酮含量变化呈正相关,其上游调控序列存在与黄酮调控相关的顺式元件,意味着Gb F3’H可能参与了银杏黄酮类物质的合成代谢,并与黄酮类物质向花青素合成分流有关。

关 键 词:银杏  类黄酮3’羟化酶  黄酮  表达调控
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