| 猪圆环病毒-Ⅱ型、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒三重RT-qPCR检测方法的建立及初步应用 |
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| 引用本文： | 刘斌,赵翠青,刘立明,沙万里,董文龙,刘嘉琳,李国江.猪圆环病毒-Ⅱ型、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒三重RT-qPCR检测方法的建立及初步应用[J].中国兽医学报,2022(7):1309-1314. |
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| 作者姓名： | 刘斌 赵翠青 刘立明 沙万里 董文龙 刘嘉琳 李国江 |
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| 作者单位： | 1. 吉林农业大学动物科学技术学院;2. 吉林省预防兽医学重点实验室;3. 吉林农业科技学院动物科技学院 |
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| 基金项目： | 吉林省科技发展计划资助项目(20200602048ZP)； |
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| 摘 要： | 针对猪圆环病毒-Ⅱ型(porcine circovirus typeⅡ,PCV-Ⅱ)、猪瘟病毒(swine fever virus, CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)的保守区域设计用于构建荧光定量PCR体系的引物和探针。以构建的重组质粒标准品为模板建立三重荧光定量PCR体系，并对三重荧光定量PCR体系进行优化和特异性检测、灵敏性检测、重复性试验、标准曲线制作。最后利用构建的三重荧光定量PCR体系和普通PCR体系同时进行临床检测，并对两者的检测结果进行对比。结果显示，3种病毒在单重和三重荧光定量PCR体系中均无非特异性扩增；3种病毒在单重和三重荧光定量PCR体系中的灵敏度均可达到10拷贝/μL;单重和三重荧光定量PCR体系组内和组间重复性变异系数均在5%以内；单重和三重荧光定量PCR在稀释度范围内呈现良好的线性关系。应用本研究构建的三重荧光定量PCR体系对106份临床组织样品进行检测，其中PCV-Ⅱ阳性检出率为74.5%,CSFV阳性检出率为34.9%,PRRSV阳性...
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| 关 键 词： | 猪圆环病毒-Ⅱ型 猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 荧光定量PCR |
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