貉源细小病毒(RDPV)HeB17株的分离鉴定及基因组序列分析

为了解我国河北省貉细小病毒(RDPV)生物学特性，通过细胞培养从河北省某貉养殖场发病貉组织样品中分离到1株病毒，经病料样品的PCR鉴定、病毒分离培养及形态学观察、猪红细胞凝集试验、基于VP2基因建立的系统发生树分析、同源性分析、动物回归试验等方法对分离株进行鉴定。结果显示，用特异性引物对病料样品进行PCR鉴定，可扩增得到573 bp特异性条带；分离病毒可在F81细胞中进行培养并产生明显的CPE;电镜下可见25 nm左右细小病毒样病毒粒子；猪红细胞凝集试验(HA)结果显示，分离株对猪红细胞血凝效价可达到1∶1 024;VP2基因序列比对及进化分析结果显示，RDPV-HeB16与RPDV-LN10-1处于同一进化分支；同源性分析结果显示，与参考序列VP2基因相似性在98.4%～99.5%之间；将病毒培养物感染健康貉，结果显示感染组的貉均出现典型RDPV临床症状，正常对照组未发病。综上所述，本研究结果表明从发病貉病料样品中分离到1株RDPV,命名为RPDV-HeB17。本研究所获数据将对我国RDPV的流行及该病毒的遗传进化分析、疫苗和诊断制品的研究提供参考。