| 环介导等温扩增技术检测柔嫩艾美耳球虫二氢蝶酸合酶N377D突变 |
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| 引用本文： | 耿天天,王雅乐,罗莉妍,申邦,方瑞,胡敏,赵俊龙,周艳琴.环介导等温扩增技术检测柔嫩艾美耳球虫二氢蝶酸合酶N377D突变[J].中国兽医学报,2022(8):1607-1611. |
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| 作者姓名： | 耿天天 王雅乐 罗莉妍 申邦 方瑞 胡敏 赵俊龙 周艳琴 |
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| 作者单位： | 1. 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室;2. 湖北省预防兽医学重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划专项“畜禽重要病原耐药性检测与控制技术研究”资助项目(2016YFD0501303)； |
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| 摘 要： | 面对日益严重的磺胺类药物的耐药性，传统的耐药性检测方法已不能满足临床需求，因此开发一种磺胺耐药柔嫩艾美耳球虫检测方法十分必要。本试验建立一种使用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)来准确区分柔嫩艾美耳球虫二氢蝶酸合酶(dihydropteroate synthase, DHPS)基因中的点突变(A1129G)的方法。对LAMP反应进行优化，发现在68℃,60 min时，反应的灵敏度和特异性均达到最佳。此时，该方法的最低检测限40 fg,并对5种病原体显示出特异性。在检测的所有46个现场样品中，有43个为阳性结果。
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| 关 键 词： | 鸡球虫病 耐药性 环介导等温核酸扩增技术 单核苷酸多态性 |
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