中国家鹅血管紧张素转化酶2(ACE2)基因的克隆、表达及序列解析

通过对中国家鹅血管紧张素转化酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)基因进行克隆、表达、序列信息分析以及对中国家鹅SARS-CoV-2易感性进行分析，旨在为鹅ACE2方面的研究提供基础资料。以中国家鹅为研究对象，检测其不同组织的ACE2基因表达，并扩增出肾组织的ACE2全基因编码区序列。将ACE2目的基因与pMD-19T重组后导入DH5α感受态细胞，随机挑取单菌落进行菌液PCR和酶切验证，并对验证为阳性的单菌落进行测序。对测序所得序列进行生物信息学分析，同时对鹅与人及其他动物ACE2结合SARS-CoV-2的氨基酸序列进行了差异性比较。结果显示，鹅体内有ACE2表达，并在肾脏中有较高的表达水平；扩增出该鹅的ACE2基因ORF序列长度为2 473 bp,编码808个氨基酸，氨基酸序列与中国麻鸭的同源性最高，且处在同一进化分支中；进一步对ACE2编码蛋白质分析显示，该中国家鹅ACE2蛋白有较高亲水性，为Ⅰ型跨膜蛋白，信号肽位于第1～17氨基酸之间；此外，对鹅与人及其他动物ACE2的SARS-CoV-2结合关键氨基酸序列的比较显示，鹅与人等对SARS-...