内肽酶O对马链球菌兽疫亚种突破血脑屏障的影响

运用同源重组法构建马链球菌兽疫亚种(SEZ) ATCC35246株(SEZ WT)pepO基因缺失株(SEZ△pepO)及互补株(SEZ C△pepO),比较分析pepO基因对SEZ形态特征、生长性能、感染小鼠的能力、小鼠全血存活率及小鼠脑组织定殖能力的影响；观察感染后小鼠脑组织的病理变化；选取人脑微血管内皮细胞(hBMEC)为体外血脑屏障模型细胞，测定pepO基因对hBMEC细胞的黏附侵袭能力以及对体外血脑屏障模型的穿透能力的影响。结果显示，pepO基因缺失后不影响SEZ在培养基中的生长速率，也不影响SEZ在小鼠全血中的存活率，但缺失株感染小鼠的能力显著降低(P<0.05),在小鼠脑组织细菌载量显著降低(P<0.05);SEZ WT株和SEZ C△pepO株感染组小鼠脑组织出现明显充血、出血、水肿的脑膜炎症状，组织切片可见大量出血及炎性细胞浸润，SEZ△pepO株感染组小鼠脑组织未见明显病变；SEZ△pepO对hBMEC细胞的黏附侵袭率以及对体外血脑屏障模型的穿透率较SEZ WT和SEZ C△pepO均显著降低(P<0.001)。本研究初步证明内肽酶O与SEZ毒力密...