| 猪轮状病毒VP4、VP6蛋白原核表达及多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 王奕斐,洪大林,米雪,杜琛,边金妮,陈樱,韦祖樟,黄伟坚,欧阳康.猪轮状病毒VP4、VP6蛋白原核表达及多克隆抗体的制备[J].中国兽医学报,2022(11):2171-2180. |
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| 作者姓名： | 王奕斐 洪大林 米雪 杜琛 边金妮 陈樱 韦祖樟 黄伟坚 欧阳康 |
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| 作者单位： | 1. 广西大学动物科学技术学院广西高校动物疫病预防与控制重点实验室;2. 广西壮族自治区兽用生物制品工程研究中心 |
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| 基金项目： | 广西自然科学基金资助项目(2021GXNSFAA196067)； |
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| 摘 要： | 猪轮状病毒(porcine rotavirus, PoRV)属于呼肠孤病毒科，轮状病毒属，是引起幼年仔猪发生腹泻的主要病原之一，常与其他病原发生混合感染。PoRV结构蛋白VP4、VP6分别组成病毒的纤突及内衣壳，在病毒侵入、复制以及维持病毒粒子形态中起到重要作用。为研究PoRV VP4和VP6蛋白相关特性，分别扩增VP4开放阅读框中抗原性较好的两部分：58～1 080 bp基因片段(1 023 bp)、1 657～2 328 bp基因片段(672 bp),以及VP6完整开放阅读框(1 191 bp),成功构建重组表达质粒pET32a-VP4-672、pET32a-VP4-1023和pET32a-VP6,经测序正确后转化BL21感受态细胞中，经IPTG诱导，重组蛋白均以包涵体形式表达，融合蛋白大小分别约为44,58,64 kDa,与预期大小相符。将纯化后的蛋白免疫新西兰大白兔，制备兔源多克隆抗体，间接ELISA方法测定多抗效价均在1∶106以上，免疫印迹(Western blot)和间接免疫荧光(IFA)检测结果显示多抗均可与病毒蛋白产生良好的抗原抗体反应。本研究结...
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| 关 键 词： | 猪轮状病毒 VP4 VP6 原核表达 多克隆抗体 |
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