| 非洲猪瘟病毒I226R蛋白原核表达及检测I226R抗体间接ELISA方法的建立 |
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| 引用本文： | 柯军男,张国军,岳慧贤,张艳艳,齐宇,蒋依倩,陈腾,李影,扈荣良.非洲猪瘟病毒I226R蛋白原核表达及检测I226R抗体间接ELISA方法的建立[J].中国兽医学报,2022(12):2347-2355. |
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| 作者姓名： | 柯军男 张国军 岳慧贤 张艳艳 齐宇 蒋依倩 陈腾 李影 扈荣良 |
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| 作者单位： | 1. 吉林农业大学动物医学学院;2. 吉林大学动物医学学院人兽共患病研究教育部重点实验室;3. 中国农业科学院长春兽医研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金联合资助项目(U19A2039)； |
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| 摘 要： | 本实验室前期构建了缺失I226R基因的非洲猪瘟病毒(ASFV)减毒株SY18△I226R,将其高、低单剂量(分别为107TCID50和104TCID50)接种家猪21 d后，对致死剂量ASFV SY18毒株的攻击，免疫猪均能达到100%保护，具有作为ASF疫苗候选株的潜力。为了能够有效区别家猪感染ASFV野毒株和SY18△I226R减毒株，本试验从ASFV SY18株基因组中扩增得到I226R基因片段，克隆到原核表达载体pET32a,将重组质粒转化BL21(DE3)感受态细胞后诱导表达，纯化后获得I226R蛋白(pI226R)。以纯化的pI226R为包被抗原，以不同缺失毒免疫猪或自然毒感染康复猪血清为检测对象，建立了针对pI226R抗体的间接ELISA检测方法。结果显示，pI226R重组质粒在BL21(DE3)细胞中经IPTG诱导表达，获得的蛋白大小为28 kDa。以pI226R为包被抗原的间接ELISA检测结果显示，该方法对阴性猪血清和SY18△I226R疫苗候选株接种猪血清检测的D45...
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| 关 键 词： | 非洲猪瘟病毒 I226R蛋白 原核表达 间接ELISA |
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