褪黑素对LPS诱导的犊牛睾丸支持细胞氧化应激和凋亡的影响

为了探究犊牛睾丸支持细胞(SCs)在血睾屏障形成过程中受到细菌感染的影响以及褪黑素的缓解作用。本试验使用CCK-8试剂盒测定SCs活力，活性氧(ROS)试剂盒、谷胱甘肽(GSH)试剂盒和超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒分别测量ROS、GSH的表达和SOD活性，Western blot和RT-PCR分析Nfr2、HO-1、p53、Caspase3和Connexin43表达量。结果表明，5 mg/L LPS可以激活Nfr2/HO-1信号通路和p53信号转导，从而显著上调ROS和Caspase3的表达量，显著下调SOD和GSH的活性和表达，造成SCs氧化应激和细胞凋亡，进而下调Connexin43蛋白的表达，降低细胞活力。加入50μmol/L褪黑素后，可以显著抑制激活Nfr2/HO-1信号通路和p53信号转导，从而显著下调ROS和Caspase3的表达量，显著上调SOD和GSH的活性和表达，缓解LPS造成SCs氧化应激和细胞凋亡，进而恢复Connexin43蛋白的表达和细胞活力。结果说明，褪黑素可以缓解LPS诱导SCs的氧化应激和细胞凋亡，对Connexin43蛋白表达有保护作用。