| 猪IFN-α14的表达、纯化及抗病毒活性分析 |
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| 引用本文： | 方剑玉,白杰,席燕燕,黄慧敏,徐引弟,王改利,张青娴,徐彬,李绍钰,王克领.猪IFN-α14的表达、纯化及抗病毒活性分析[J].中国兽医学报,2022(10):1994-2000. |
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| 作者姓名： | 方剑玉 白杰 席燕燕 黄慧敏 徐引弟 王改利 张青娴 徐彬 李绍钰 王克领 |
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| 作者单位： | 1. 河南省农业科学院畜牧兽医研究所;2. 畜禽繁育与营养调控河南省重点实验室;3. 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室 |
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| 摘 要： | 干扰素(interferon, IFN)是一类具有抗病毒和免疫调节功能的细胞因子，目前已经应用于多种人和动物病毒病的预防和治疗。不同猪干扰素亚型的抗病毒活性差异较大，为了解猪IFN-α14的抗病毒活性，将猪IFN-α14基因序列进行分析，去除信号肽、优化密码子，并采用基因合成的方法合成了猪IFN-α14亚型基因，将其克隆入pCSMH原核表达载体，优化诱导条件，利用Ni琼脂糖凝胶纯化柱进行亲和层析，获得高纯度的重组猪IFN-α14蛋白，Western blot检测证明重组蛋白具有较好的特异性。用不同浓度的重组猪IFN-α14处理Vero细胞后，接种1 000 TCID50猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV),24 h收集细胞和上清，通过荧光定量检测细胞内病毒的RNA水平，同时测定细胞上清中病毒的TCID50。猪IFN-α14蛋白被成功表达并纯化，证明了10μg/L的重组猪IFN-α14干扰素能够显著抑制PEDV的复制。与本实验室前期表达纯化的猪IFN-α2、8相比，猪IFN-α14抑制P...
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| 关 键 词： | 猪IFN-α14 抗病毒活性 大肠杆菌表达 猪流行性腹泻病毒 |
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