黄瓜胚性愈伤组织的诱导保存和再生

【目的】对黄瓜胚性愈伤组织的诱导保存和再生进行研究，为黄瓜高频率遗传转化奠定基础。【方法】以欧洲温室型黄瓜自交系14-1子叶节为外植体，在MS培养基上附加1.5 mg/L 2,4-D，进行25 d的胚性愈伤组织诱导培养后，取胚性愈伤组织在添加30，60，90，100，110，120，130，140和150 g/L蔗糖及1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基进行继代培养，每30 d继代1次，观察胚性愈伤组织的褐变情况及胚性分化能力，并用电子天平在超净工作台中记录胚性愈伤组织质量的变化。继代培养60 d后，将保存的胚性愈伤组织和体细胞胚移至含1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上，待出现体细胞胚后移至MS培养基进行萌发，观察再生小植株的生长情况。【结果】将欧洲温室型黄瓜自交系14-1的子叶节，接种到附加1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上进行诱导培养后，子叶节一端的愈伤组织集中聚集于下胚轴处，之后有黄色胚性愈伤组织产生。在继代培养过程中，当培养基中添加的蔗糖为60～150 g/L时，胚性愈伤组织能保持胚性愈伤状态达60 d。之后将继代培养60 d后的胚性愈伤组织转接至附加1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上，在蔗糖质量浓度为60 g/L条件下保存的胚性愈伤组织可诱导出正常胚状体，且能形成健康小植株。【结论】由黄瓜子叶节诱导出的胚性愈伤组织可在MS+60 g/L蔗糖的培养基上保存达60 d，之后能正常萌发形成胚状体，进而形成正常小植株。

Induction and preservation of cucumber embryogenic callus