| 猪组成型雄烷受体激动剂高通量药物筛选模型的建立 |
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| 引用本文： | 石宝明,娄蕾,单安山.猪组成型雄烷受体激动剂高通量药物筛选模型的建立[J].东北农业大学学报,2013,44(3):25-29. |
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| 作者姓名： | 石宝明 娄蕾 单安山 |
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| 作者单位： | 东北农业大学动物营养研究所,哈尔滨,150030 |
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| 基金项目： | 黑龙江省教育厅科学技术研究项目资助 |
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| 摘 要： | 构建猪组成型雄烷受体(pgCAR)激动剂体外高通量筛选模型。利用RT-PCR技术从猪肝脏总RNA中扩增出pgCAR基因序列,将测序后正确的pgCAR片段连接到pcDNA 3.1 vector上构建表达载体pcDNA 3.1-CAR;将合成的5个拷贝NR1(Nuclear receptor sites)插入PGL3-TK-promoter构成报告质粒(NR1)5-TK-luc,与PRL-TK报告质粒构成双荧光报告系统。用PEI转染技术将表达载体与报告质粒共转染HepG 2细胞株中,通过检测荧光素酶基因表达状况评价具有生物活性配体化合物对pgCAR激动活性。阳性药苯妥英钠明显提高荧光素酶的表达,最大上调倍增数可达约2.53倍,并且在一定浓度下阳性药与相对荧光酶的活性表达有较好量效关系。
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| 关 键 词： | 猪组成型雄烷受体 激动剂 共转染 高通量筛选 |
Establishment of a cell-based high-throughput screening model for pig CAR agonist |
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| SHI Baoming
,
LOU Lei
,
SHAN Anshan.Establishment of a cell-based high-throughput screening model for pig CAR agonist[J].Journal of Northeast Agricultural University,2013,44(3):25-29. |
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| Authors: | SHI Baoming LOU Lei SHAN Anshan |
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| Institution: | (Institute of Animal Nutrition,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | pgCAR agonist cotransfection high-throughput screening |
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