| FMDV2A介导的乳腺上皮细胞双基因表达载体构建及表达 |
| |
| 引用本文： | 陈秋菊,王韵斐,崔易虹,朱广琴,杨明明,宋宇轩,曹斌云. FMDV2A介导的乳腺上皮细胞双基因表达载体构建及表达[J]. 畜牧兽医学报, 2011, 42(10) |
| |
| 作者姓名： | 陈秋菊 王韵斐 崔易虹 朱广琴 杨明明 宋宇轩 曹斌云 |
| |
| 作者单位： | 西北农林科技大学动物科技学院,杨凌,712100 |
| |
| 基金项目： | 国家"863"项目资助，陕西省13115重大科技创新专项 |
| |
| 摘 要： | 构建FMDV 2A介导的人白细胞介素2基因(hIL-2)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因双顺反子乳腺特异性表达载体,并验证其在乳腺上皮细胞中的表达.克隆奶山羊β-酪蛋白启动子序列,将hIL-2基因序列置于启动子之后,然后利用口蹄疫病毒2A(FMDV 2A)自剪切序列连接EGFP基因,构建出乳腺特异性的双顺反子表达载体pFIENβ,并利用脂质体转染山羊乳腺上皮细胞,然后用RT-PCR技术和Western blot检测hIL-2基因与EGFP基因的表达.重组质粒pFIENβ经酶切鉴定后表明构建成功,转染质粒PFIENβ和pEGFP-C1的细胞均观察到绿色荧光；从转染pFIENβ的乳腺上皮细胞中扩增出hIL-2基因和EGFP基因,而转染pEGFP-C1的细胞中只扩增出EGFP基因；经Western blot检测,转染pFIENβ的细胞中均表达了hIL-2和EGFP蛋白.结果表明山羊β-酪蛋白启动子能同时启动hIL-2基因和EGFP基因在山羊乳腺上皮细胞中的表达,并且利用FMDV 2A元件实现了hIL-2基因和EGFP基因的非融合型表达.
|
| 关 键 词： | 人白细胞介素2 EGFP FMDV 2A 双顺反子 |
Construction and Coexpression of Bicistronic Expression Vector Based on FMDV 2A in Mammary Gland Cells |
| |
| CHEN Qiu-ju,WANG Yun-fei,CUI Yi-hong,ZHU Guang-qin,YANG Ming-ming,SONG Yu-xuan,CAO Bin-yun. Construction and Coexpression of Bicistronic Expression Vector Based on FMDV 2A in Mammary Gland Cells[J]. Chinese Journal of Animal and Veterinary Sciences, 2011, 42(10) |
| |
| Authors: | CHEN Qiu-ju WANG Yun-fei CUI Yi-hong ZHU Guang-qin YANG Ming-ming SONG Yu-xuan CAO Bin-yun |
| |
| Affiliation: | CHEN Qiu-ju1,WANG Yun-fei1,CUI Yi-hong1,ZHU Guang-qin1,YANG Ming-ming1,SONG Yu-xuan1,CAO Bin-yun1* (College of Animal Science and Technology,Northwest A&F University,Yangling 712100,China) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | hIL-2 EGFP FMDV 2A bicistronic expression vector |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
